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〔目的〕
采用灌服高脂高糖乳剂及注射链尿佐菌素复制糖尿病动物模型后，再给予孤养及慢性不可预见性刺激的复合处理构建糖尿病合并抑郁大鼠模型。观察糖尿病合并抑郁大鼠动物模型的行为学变化、神经内分泌变化、糖脂代谢、肝胰岛素抵抗变化及肝胰岛素IRS-2-PI3K-AKT信号通路变化，探讨糖尿病合并抑郁的发病机理。观察丹栀逍遥散对糖尿病合并抑郁的治疗作用，探讨疏肝解郁方药防治糖尿病合并抑郁的作用机制。
〔方法〕
1.经Open-Field行为学评分后，雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、抑郁组(孤养及慢性不可预见性刺激)、糖尿病模型组(灌服高脂高糖乳剂及注射低剂量STZ)、糖尿病合并抑郁组(灌服高脂高糖乳剂及注射低剂量STZ后；再孤养及慢性不可预见性刺激)，观察各组大鼠体重；行为学改变(旷场实验、赏识实验)；糖耐量、空腹血糖、血脂、胰岛素和胰岛素抵抗指数的变化。
2.采用放射免疫法测定下丘脑组织CRH、血清ACTH和CorT水平；酶联免疫法检测大鼠神经递质NE、5-HT水平。
3.RT-PCR法检测肝组织IR、IRS-1、IRS-2、PI3K和AKTmRNA的表达和WesternBlotting法检测大鼠肝组织PI3K和AKT的蛋白表达；HE染色观察胰腺、垂体和肾上腺的病理变化。
4.观察丹栀逍遥散对糖尿病合并抑郁大鼠行为学；空腹血糖、糖耐量、胰岛素、胰岛素抵抗指数；肝糖原、游离脂肪酸；HPA轴激素、肝组织胰岛素IRS-2-PI3K-AKT信号通路的mRNA和蛋白表达的影响。
〔结果〕
1.抑郁组大鼠的体重、活动度、1％蔗糖水消耗量下降，与对照组比较有显著性差异；而其相应的糖代谢有关指标无显著改变。糖尿病模型组大鼠活动度下降、血糖和血脂升高、糖耐量、胰岛素水平和胰岛素抵抗指数与对照组比较均有显著性差异，胰岛细胞损伤明显，与临床指标和症状一致。糖尿病合并抑郁大鼠活动度下降，1%蔗糖水消耗量下降，血糖和血脂升高，胰岛素水平和胰岛素抵抗指数升高，均与对照组比较有显著性差异。其中活动度、血糖、1%蔗糖水消耗量与糖尿病模型组比较有显著性差异，血脂、胰岛素水平和胰岛素抵抗指数比糖尿病模型组更加紊乱的趋势；肝糖原下降、游离脂肪酸升高更加明显，与糖尿病模型组比较有显著性差异；胰岛细胞损伤更明显。
2.抑郁组大鼠HPA轴激素升高；神经递质NE和5-HT水平有下降趋势，下丘脑CRH、CorT水平升高均与对照组有显著性差异；垂体-肾上腺细胞数量增多和体积增大，排列紊乱，而肝组织胰岛素信号通路没有变化。糖尿病模型组和糖尿病合并抑郁大鼠HPA轴激素升高，下丘脑CRH和血清CorT升高与对照组比较有显著性差异；垂体和肾上腺均表现为细胞数量增多和体积增大，排列紊乱。神经递质NE和5-HT水平均下降，与对照组比较有显著性差异，而5-HT水平下降更为明显，与糖尿病模型组比较有显著性差异。
3.糖尿病模型组大鼠肝组织的IRS-1mRNA表达有下降趋势，IRS-2 mRNA、PI3K和AKT mRNA和蛋白表达均下降，与对照组比较有显著性差异；糖尿病合并抑郁组的肝组织IRS-2 mRNA、PI3K mRNA和蛋白下降更为明显，与糖尿病模型比较有显著性差异。
4.丹栀逍遥散增加模型大鼠的水平和垂直活动，提高活动度，改善抑郁状态；降低HPA轴激素水平，改善紊乱的神经内分泌；降低空腹血糖和胰岛素水平、有降低糖耐量的趋势、减弱胰岛素抵抗，能降低游离脂肪酸水平；提高胰岛素靶器官肝组织IRS-2-PI3K-AKT信号通路的表达。
〔结论〕
1.采用高脂高糖乳剂加链尿佐菌素复制糖尿病模型后，再给予孤养及慢性不可预见刺激复合方法所建立的糖尿病合并抑郁大鼠模型，其整体活动度、体重、糖水赏识等指标显著降低，空腹血糖、胰岛素升高、糖耐量指标以及胰岛素抵抗指数升高，肝糖原含量下降、游离脂肪酸含量升高、血脂紊乱，并且表现出HPA轴功能亢进和儿茶酚胺类神经递质含量下降以及胰岛损伤的病理改变。上述改变符合糖尿病合并抑郁状态的病理生理变化，表明造模成功。
2.糖尿病合并抑郁组大鼠表现出HPA轴功能进一步亢进和儿茶酚胺类神经递质NE和5-HT含量下降，可引起胰岛素靶器官肝组织IRS-2-PI3K-AKT信号通路损伤进一步加重。推测上述机制是引起模型动物抑郁行为学表现和糖代谢紊乱等糖尿病合并抑郁病理生理变化的主要因素之一。
3.丹栀逍遥散可改善糖尿病合并抑郁模型大鼠的糖代谢和改善其抑郁症状；其机理可能是通过调整大鼠的神经内分泌功能、提高肝组织IRS-2mRNA表达和下游PI3K-AKTmRNA和蛋白的表达，从而增强IRS-2-PI3K-AKT信号通路活性等途径实现的。
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