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目的1.通过比较不同培养方法对冻融人卵巢组织内卵泡生长发育的影响，以期寻求更好的培养方法。2.探讨冻融人卵巢组织异种移植后组织存活及卵泡生长发育的情况，寻求能够减少移植物缺血损伤的方法。方法2012年1～4月取15例安徽医科大学第一附属医院妇产科卵巢成熟性畸胎瘤患者的卵巢组织，采用玻璃化冷冻技术保存，复苏后用不同的组织培养方法进行体外培养，根据培养方法的不同将培养分3组：冻融的人卵巢组织单独培养组（A组）；冻融的人卵巢组织与人早孕蜕膜单层细胞共培养组（B组）；Matrigel培养基培养的冻融的人卵巢组织组（C组）。培养14d后，各培养组取部分组织固定并检测各组卵巢组织中总体卵泡存活率(TFSR)及生长卵泡率(GFR)，B组和C组取另部分组织移植到裸鼠皮下。根据移植卵巢组织的不同将移植组分为3组（每组裸鼠4只，移植卵巢组织8块）：冻融人卵巢组织直接移植（O组）作为对照组；冻融人卵巢组织与人早孕蜕膜单层细胞共培养后移植（B1组）；冻融人卵巢组织与Matrige培养基培养后移植（C1组）。移植术后1个月取出的移植物，行组织学检查。结果1.与B、C组比较，A组TFSR和GFR均降低，差异有统计学意义（P <0.05）；B组和C组比较TFSR和GFR无明显变化，差异无统计学意义。2.与O组相比B1、C1组移植卵巢组织回收率和存活率无明显变化，差异均无统计学意义(P>0．05)，且回收卵巢组织内卵泡GFR无明显变化，差异均无统计学意义(P>0．05)；B1和C1组比较移植卵巢组织回收率、存活率及组织内卵泡GFR无明显变化，差异均无统计学意义(P>0．05)。结论1.冻融卵巢组织中的原始卵泡在不同体外培养体系中有不同程度的生长；冻融卵巢组织与人早孕蜕膜细胞共培养或Matrigel培养基培养相对于单独培养更有利于卵泡存活和生长，但这两种培养方法之间没有明显差别，因而我们可以考虑应用人早孕蜕膜单层细胞替代Matrige做培养基达到避免动物源性污染的目的，但广泛应用仍需要大样本的实验研究。2.导致各组移植结局均不好的原因可能有：1）取材不佳，畸胎瘤患者的卵巢皮质内卵泡密度毕竟低于正常卵巢皮质内卵泡密度；2）对卵巢组织活力评估方法有限，被检测卵巢组织切片并不能完全代表移植的组织情况；3）移植位置不佳，尽管裸鼠皮下可以为移植物提供足够的生长空间，但裸鼠皮下血管没有肌肉内丰富，这也可能导致移植后血管重建减慢。基于以上所分析的因素，以后实验可以通过改变前述各种可能的不利于因素，以期改善移植卵巢组织存活和生长发育情况，提供更多的数据的来进一步阐明体外培养对移植结局的影响。