牛卵丘-卵母细胞复合体中 uPA和 uPAR蛋白表达检测

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:D243435dsfsdfqwe
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尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)与其受体uPAR结合后,能够激活体细胞内多条信号通路,促进细胞有丝分裂,抑制细胞凋亡。但是uPAR是否在牛COCs中表达以及uPA在牛卵泡内表达的意义,尚未见文献报道。为了了解uPA与其特异受体uPAR在牛卵丘一卵母细胞复合体(COCs)中的协同表达情况,本研究以未成熟牛卵丘一卵母细胞复合体为研究对象,运用免疫组化和Western blot技术,分别检测了uPA与uPAR蛋白在牛次级卵泡与卵丘和卵母细胞中的表达情况。免疫组织化学检测结果显示,在卵丘、颗粒和卵泡膜细胞内uPA与uPAR蛋白均有表达,而卵母细胞仅表达uPAR; Western blot检测结果显示,获得的约55kD和43kD大小蛋白条带与uPA与uPAR蛋白预期大小相符,不仅证明了人源两种抗体在牛属细胞上使用的有效性,而且验证了免疫组化技术在牛卵丘与卵母细胞蛋白表达检测的结果。极体排出率统计结果显、示,uPA组卵母细胞第一极体排出率显著升高,而同时添加其受体抗体阻断功能后,卵母细胞第一极体排出率显著降低,推测uPA通过其受体途径能够促进牛卵母细胞的核成熟进程。本研究结果对于深入理解牛卵泡发育与卵母细胞成熟机制有重要意义。
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