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本论文选用山东平邑金银花(忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thumb.)为研究材料,通过盆栽试验,研究氮肥和苯丙氨酸对金银花绿原酸的影响。氮肥试验按照随机区组设计,肥料配方设三个不同的氮肥水平(氮素g/株)分别为0.5、1.0、1.5;同时设三个不同的铵硝比分别为全铵、5:5、全硝,共九个处理。苯丙氨酸采用四个浓度1000ppm、2000ppm、3000ppm、4000ppm,以清水为对照,处理金银花小苗。主要研究结果如下:
1、采用超声辅助提取法提取金银花中的绿原酸,紫外分光光光度法测定绿原酸含量,采用NaNO2-Al(NO3)3比色法测定类黄酮的含量,选择超声功率、超声提取温度、料液比和间歇比等因素对超声辅助提取进行了单因素试验和正交试验,优化了超声波辅助提取金银花绿原酸的参数:85％乙醇浓度,料液比1:40,浸提提取温度为50℃,超声波功率200W,超声提取温度45℃,提取3次,超声处理时间为10min,间歇比1:4,同时研究了温度对绿原酸稳定性和提取的影响。其中料液比和超声提取温度对金银花绿原酸的提取率有较大影响。
2、通过不同铵硝比及施用量的氮肥,我们发现当氮肥施用量为1.0g/株时,金银花干重最大,为0.6036g,金银花成活率最高,94.17％;金银花绿原酸和类黄酮含量都随着氮肥施用量的降低而增加,用量为0.5g/株时,绿原酸含量为5.15％,类黄酮含量是3.35％。当铵硝比的下降,金银花花蕾干重降低,成活率降低,金银花绿原酸含量增加,类黄酮变化明显。全铵时金银花花蕾干重最大,0.6238g,金银花植株成活率最高,是84.17％,全销时绿原酸含量为5.64％,铵硝比为5:5时,类黄酮含量为3.33％。
结果显示,氮肥的增加能够促进金银花生长发育,提高金银花花蕾干重,但对绿原酸含量和类黄酮的积累有负影响。铵硝比的降低不利于金银花的干重和成活率的提高,却能够显著地提高绿原酸的含量。氮肥用量与铵硝比存在显著的互作效应。实验结果的最佳处理组合是全硝,氮肥用量为0.5g,金银花干重为0.5825g,金银花绿原酸含量为6.64％,此时单位重量的金银花绿原酸总量最多。说明增加硝态氮的比例,能够既保证金银花干重,又能提高金银花绿原酸的含量。
3、铵态氮和硝态氮对金银花生长发育和绿原酸积累影响不一致,与硝态氮相比,铵态氮能够促进金银花成活率,在铵态氮4.0g处理下,金银花植株成活率为60％,是相同水平硝态氮处理下的6倍。全铵处理下,金银花大白期花蕾干重最大,平均为0.6238g,全销时绿原酸含量最高,5.64％,绿原酸含量随着铵硝比的下降而升高。说明铵态氮有利于金银花生长和干重的增加,硝态氮有利于金银花绿原酸和类黄酮的积累。
4、叶面喷施一定量的苯丙氨酸能够促进金银花绿原酸和类黄酮含量的增加,当苯丙氨酸浓度为2000ppm时,绿原酸和类黄酮含量最高,说明苯丙氨酸作为绿原酸重要的中间代谢物质,能够起到调节金银花绿原酸积累。