血链球菌细菌素对念珠菌细胞表面疏水性和细胞膜钙离子通透性的影响

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目的:研究研究血链球菌细菌素(Streptococcus sanguis bacteriocin)对单独及混合培养的白色念珠菌(Candida albicans, C.albicans)及热带念珠菌(Candida tropicalis,C.tropicalis)细胞表面疏水性的影响;研究血链球菌细菌素对单独及混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌细胞膜钙离子通透性的影响。进一步探讨血链球菌细菌素对念珠菌的抑制作用。方法:1.复苏并传代血链球菌标准株ATCC10556,通过低温高速离心、超声破碎等方法提取血链球菌细菌素,即血链素。2.采用二倍稀释法将血链素稀释成不同浓度,并使其作用于单独及混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌,于37℃,80rpm恒温振荡培养,12小时后,采用平板菌落计数法观察血链素的最小抑菌浓度(MIC)。3.运用微生物黏着碳氢化合物[1]的方法,将1g/L的血链素分别作用于单独及混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌,共同于37℃,80rpm恒温振荡培养,12小时后测定菌悬液OD值,并计算白色念珠菌及热带念珠菌的疏水率。4.分别向单独及混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌菌悬液中装载钙离子荧光探针(Fluo-3AM),利用激光共聚焦显微镜,观察血链素作用12小时后,细胞内钙离子浓度的变化。结果:1.血链素对单独培养的白色念珠菌及热带念珠菌的MIC为0.25g/L,血链素对等量混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌的MIC为0.5g/L。2.血链素作用后,单独及混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌的细胞表面疏水率均明显降低,与对照组相比具有显著差异(P<0.05)。3.在血链素的作用下,单独及混合的白色念珠菌及热带念珠菌细胞内钙离子浓度均明显降低,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.血链素对单独及混合培养的白色念珠菌及热带念珠菌具有显著抑制作用。2.血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞表面疏水性降低。3.血链素可以导致白色念珠菌及热带念珠菌细胞膜钙离子通透性增强。
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