液体培养法快速测定甘蓝自交亲和性的方法研究

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甘蓝在我国的栽培面积很大,在蔬菜产业中占有重要的地位。甘蓝利用杂交种呈现杂种优势,杂交种生产传统方法是利用自交不亲和系配制,其主要存在杂交种杂交率达不到100%,种子生产中混有自交种的现象,这易引起减产和丢失亲本。因而,甘蓝雄性不育系选育和利用快速代替了自交不亲和系应用。甘蓝雄性不育系的保持系选用自交亲和系,它是一种省时省力的育种途径;但甘蓝育种中缺乏准确又快速鉴定自交亲和性的方法就成为阻碍提高育种效率的障碍。本试验以甘蓝自交高度亲和、自交亲和、自交不亲和、自交高度不亲和等4种自交不同亲和程度材料为试材,探讨不同液体培养基与柱头数量、不同培养方式和不同培养时间等影响自交不同亲和程度材料花粉离体培养效果,并与常规法测定自交亲和性结果进行比较和分析其一致性,创建液体培养法快速测定甘蓝自交亲和性的方法。本试验得出如下结论:(1)4种自交不同亲和程度材料花粉加入20mL NLN-14培养基中,柱头乳突细胞产生的胼胝质阻碍花粉萌发的最适柱头数量为8个。(2)筛选适宜液体培养基和培养方式,选用自交高度亲和系和自交不亲和系花粉,研究得出,最适花粉粒萌发的培养基是NLN-14,最佳培养方式是振荡培养。(3)观察花粉粒萌发适宜时间,选用自交高度不亲和系和自交亲和系花粉,研究得出,花粉粒培养萌发最佳观察时间是48h。随着培养时间的逐渐增加,花粉萌发率逐渐增加,花粉管长度增大。(4)利用液体培养测定甘蓝自交亲和性,获得快速、准确测定方法的标准:自交高度不亲和系P≦10%;自交不亲和系10%<P≦20%;自交亲和系20%<P≦30%;自交高度亲和系P>30%;花粉管长度L≧160px归为花粉粒萌发状态。试验研究获得液体培养法快速测定甘蓝自交亲和性的方法:在植株盛花期,选取当天完全开放花朵,在20mLNLN-14液体培养基中添加8个柱头,将一朵花的花粉抖落到NLN-14液体培养基上,直至抖落干净即可。然后将指形瓶放置于25℃、光照强度2000Lx,光照时间12h/d下,摇床(转速60r/min)上培养,48h后取出观察,花粉管长度≧160px归为花粉粒萌发状态,其萌发标准是:自交高度不亲和系P≦10%;自交不亲和系10%<P≦20%;自交亲和系20%<P≦30%;自交高度亲和系P>30%。
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