【摘 要】
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低CO2诱导型的NDH复合体(NDH-1MS)在蓝藻CO2浓缩过程中发挥着极为重要的作用，虽然近年来对该复合体的研究取得了很大的进展，但是该复合体的亚基组成以及活性调控机制均有待于进
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低CO2诱导型的NDH复合体(NDH-1MS)在蓝藻CO2浓缩过程中发挥着极为重要的作用，虽然近年来对该复合体的研究取得了很大的进展，但是该复合体的亚基组成以及活性调控机制均有待于进一步的研究。在本研究中，通过对Ni柱分离纯化的NDH-1S复合体进行分析我们确认了一个新的功能基因cupA-R，并将其编码的蛋白命名为CupA-R（CupA的调节因子）。在高CO2条件下，该基因的突变能够使其生长较野生型更加迅速，而且突变体的光合放氧水平以及CO2吸收能力也都强于野生型，在低pH条件下这种优势更为明显。Western结果显示，在ndhD3突变体中CupA-R的表达量明显下调，而cupA-R的突变能够使CupA的表达量上调。通过RT实验证实了CupA蛋白水平的上调是由于转录水平的升高引起的，而NDH-1S其他亚基的转录水平也与CupA类似。通过2D电泳以及酵母双杂交实验，我们证实了CupA-R定位于NDH-1S复合体中，并与NdhD3和NdhF3发生相互作用。基于以上的结果我们认为CupA-R是NDH-1MS复合体中的一个新的亚基，该亚基能够在高CO2条件下负调控NDH-1MS的活性。 除此之外，在本研究中，我们也克隆了一个新的功能基因slr0815，该基因与Δ4-2(ΔndhF4/ΔbicA/ΔcmpA/ΔsbtA)形成的五突变Δ5-slr0815在低CO2条件下不能正常生长。Western实验结果显示Slr0815定位于类囊体膜上，并且受低CO2诱导表达。NdhB和NdhD3的活性缺失能够明显减少Slr0815的蛋白表达量，而Slr0815蛋白缺失能够极大程度的抑制CupA的表达以及NDH-1S的组装。FRET实验和蔗糖密度梯度离心实验证实Slr0815能与CupA共存于同一复合体中，另外2D和酵母双杂交实验进一步证实Slr0815与CupA和CupA-R均共存于NDH-1S复合体中，Slr0815与CupA-R存在相互作用。基于以上结果，我们认为Slr0815是NDH-1MS复合体的中的一个新的亚基，该亚基影响了NDH-1MS复合体的组装以及该复合体在CO2吸收过程中的活性。
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