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背景及目的:结直肠癌是全球人类最常见的恶性肿瘤之一,预计在2030年增长率超过60%,新增病数而达到220万,并导致110万的死亡数,目前,手术、放疗和化疗是治疗结直肠癌的主要手段。但这些治疗在疾病晚期价值有限,如何早发现早治疗结直肠癌为当前的重要内容,因此,发现新的靶向分子非常关键。肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8(tumor necrosis factor-αinduced protein 8,TNFAIP8或称TIPE)家族是近年来发现的一组蛋白质,具有维持免疫平衡、调节肿瘤生长的作用。包括四个成员,即TIPE、TIPE1、TIPE2与TIPE3。TIPE3(又称TNFAIP8L3)作为磷脂酰肌醇通路中的第二信使转移蛋白促进肿瘤的发生。降低TIPE3表达对肿瘤生长的研究有助于进一步揭示TIPE3在肿瘤发生发展中的可能机制。因此我们构建TIPE3-sh RNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒,降低TIPE3在结直肠癌中的表达来研究TIPE3对其生长的影响,进而了解TIPE3在肿瘤增殖、凋亡中的作用,为结直肠癌治疗的分子治疗提供新的靶点。方法:为了研究TIPE3在结直肠癌中的作用和机制,我们首先构建了3条TIPE3-sh RNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒,通过脂质体转染法成功将干扰质粒导入SW480细胞,通过RT-PCR、Western-Blot检测重组质粒的干扰效率。应用CCK-8方法检测SW480细胞生存率。Annexin V-FITC/PI流式细胞法检测结直肠癌细胞在150μg/ml的a DR5Sc Fv诱导下的细胞凋亡情况。使用Western-Blot检测细胞增殖、凋亡相关分子的表达情况。结果:成功设计、构建和筛选具有生物活性且干扰效率最佳的TIPE3-sh RNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒。CCK-8检测证实干扰SW480结直肠癌细胞TIPE3表达24h和48h后,均可以抑制细胞生长。流式结果显示,终浓度150μg/ml的a DR5Sc Fv作用6h后,TIPE3-sh RNA3干扰组的凋亡率(Mean±SEM)为27.99±1.087%,显著高于正常细胞组12.10±2.213%及转染空载质粒组11.44±0.2770%。差异有统计学意义。证实了降低TIPE3表达可以增加SW480对a DR5Sc Fv所诱导的细胞凋亡敏感性。Western-Blot结果显示干扰TIPE3表达可以活化caspase3蛋白,降低p-AKT、p-PDK1、PCNA等分子的表达。结论:干扰TIPE3的表达对SW480结直肠癌细胞的生长具有重要作用,能够促进结直肠癌细胞的凋亡,并且抑制其增殖。