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朝鲜鹌鹑广泛分布于中国,并且具有复杂的羽色多样性。羽色作为重要的遗传标记,在确定品种纯度和系统发育中起着至关重要的作用。而酪氨酸酶(TYR)和酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)在鸟类羽色的形成过程中起着关键作用。本研究以朝鲜鹌鹑(栗羽)及其突变系黑羽和白羽为研究对象,通过实时荧光定量PCR技术、PCR-SSCP和真核表达等方法,主要探讨了TYR、TYRP1基因与朝鲜鹌鹑羽色的相关性。研究结果如下:朝鲜鹌鹑TYR基因全长编码区编码的蛋白由529个氨基酸残基组成,该蛋白被称为酪氨酸酶。它的分子量为60078.9Da,等电点为5.94。此外,带负电荷残基数为54,而带正电荷残基数为46。通过计算得到该蛋白的不稳定系数为58.15,因此被归类为不稳定蛋白。另外,通过氨基酸序列比对,发现与朝鲜鹌鹑TYR氨基酸序列相似度从高到低依次为:禽类96%;哺乳类73.9%~70.9%;两栖类67.9%和鱼类60.7%。朝鲜鹌鹑TYRP1基因编码区编码的蛋白由391个氨基酸残基组成。它的分子量为44727.8Da,等电点为9.22。此外,带负电荷残基数为20,而带正电荷残基数为32。通过计算得到该蛋白的不稳定系数为39.17,因此被归类为稳定蛋白。另外,通过氨基酸序列比对,发现与朝鲜鹌鹑TYRP1氨基酸序列相似度从高到低依次为:禽类97.8%~93.5%;哺乳类73.6%~68.4%;两栖类64.7%~64.4%和鱼类58.3%。通过实时荧光定量PCR分析,发现TYR、TYRP1基因在三种羽色(黑羽、栗羽和白羽)朝鲜鹌鹑中的表达量存在显著差异。其中,TYR基因的表达量从高到低依次为黑羽、栗羽和白羽鹌鹑;而TYRP1基因的表达量从高到低依次为白羽、栗羽和黑羽鹌鹑。通过对三种羽色朝鲜鹌鹑TYR、TYRP1基因进行测序和PCR-SSCP分析发现在TYRP1基因中发现两个多态性位点。第一个多态性位点是位于编码区367bp处的T/C突变,该突变导致亮氨酸转变为丝氨酸。通过PCR-SSCP技术对84只朝鲜鹌鹑进行基因型分析,并发现三种基因型,即AA、AB和BB。第二个多态性位点是位于编码区1153bp处的C/T突变,该突变导致苏氨酸转变为异亮氨酸。通过同样的方法对61只朝鲜鹌鹑进行基因型分析,并发现三种基因型,即AA、AB和BB。与TYRP1基因相比,测序后在TYR基因中未发现多态性位点。将pcDNA3.1(+)-TYR重组真核表达载体转染入鹌鹑胚胎,经过实时荧光定量PCR分析鹌鹑羽色相关基因的表达量。结果表明,第9日、第12日实验组中TYR基因的表达量比第9日、第12日对照组中TYR基因的表达量高;而第9日、第12日对照组中TYRP1基因的表达量比第9日、第12日实验组组中TYRP1基因的表达量高。此外,第9日、第12日实验组中MC1R基因的表达量比第9日、第12日对照组中MC1R基因的表达量高;而第9日、第12日对照组中ASIP基因的表达量比第9日、第12日实验组组中ASIP基因的表达量高。实验组中鹌鹑的羽色明显较深。综上所述,增加TYR基因的表达量或者降低TYRP1基因的表达量可能会引起朝鲜鹌鹑形成黑羽。虽然在TYRP1基因编码区中发现两个多态性位点(367T/C和1153C/T),但是未发现这两个多态性位点与朝鲜鹌鹑羽色之间存在显著相关性。另外,朝鲜鹌鹑TYR基因序列与鸡TYR基因序列高度保守,而朝鲜鹌鹑TYRP1基因序列与日本鹌鹑TYRP1基因序列高度保守。