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目的及意义：脆性X综合征（Fragile X syndrome, FXS）是最常见的遗传性智力低下疾病之一，脆性X综合征是由其致病基因 FMR1(脆性 X 智力低下基因1)的突变导致。FXR1(Fragile X related gene 1，脆性X相关基因1)与 FMR1 属于同一个基因家族，是一种对于神经、肌肉系统发育有重要调控作用的管家基因，其编码产物FXR1P具有RNA结合功能，但是目前对其结合的靶 RNA 了解十分有限，本研究利用酵母三杂交系统从人脑海马回cDNA文库中筛选FXR1P的靶RNA，以进一步阐明FXR1基因的功能。
内容和方法：1）构建用于酵母三杂交的人脑海马回 pRH3 cDNA 文库；2）将重组质粒 pYESTrp3/ FXR1 作为“诱饵”质粒，转染酵母菌 L40-ura3/ pHybLex/ Zeo-MS2，并检测毒性和自激活性；3) 应用酵母三杂交系统,从人脑海马回 cDNA 文库中筛选 FXR1P 的相互作用 RNA，得到 His+ 和 LacZ+ 阳性克隆，并通过酶切鉴定其外源性片段；4）将获得的阳性质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母菌内，对 RNA-蛋白质作用进行验证；5）对验证后的阳性克隆的外源性片段进行测序及同源性分析。
结果：1）成功构建了能用于酵母三杂交的人脑海马回 pRH3 cDNA 文库；2）将 pYESTrp3/ FXR1 质粒转化酵母菌 L40-ura3/ pHybLex/ Zeo-MS2，并通过检测证实其对酵母细胞无毒性、无自激活性；3）以 pYESTrp3/ FXR1作为“诱饵”，从胎脑cDNA文库中筛选得到 56 个 His+ 和 LacZ+ 阳性克隆；4）将初步获得的阳性质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母体内，对相互作用进行验证，共获得阳性克隆 9 个；5）对阳性克隆测序并进行同源性分析，获得阅读框正确的候选基因序列 4 个：Homo sapiens tubulin, alpha, ubiquitous (K-ALPHA-1)、Homo sapiens IQ motif containing E （IQCE）、Homo sapiens dipeptidyl-peptidase 7（DPP7）、Homo sapiens leukocyte receptor cluster（LRC）member 4,（LENG4）。
结论及意义：1）建立了应用酵母三杂交系统进行RNA-蛋白质相互作用的研究平台；2）成功构建人脑海马回 pRH3 cDNA 文库；3）筛选并鉴定出 4 个不同的基因，其编码的 RNA 可能与 FXR1P 具有相互作用，为 FXR1P 的功能提供了新的实验数据。