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研究目的：支气管哮喘(简称哮喘)是一种由多种炎症细胞和炎症因子参与的慢性气道炎症性疾病,“卫生假说”并不能解释所有的哮喘现象。哮喘病因学研究显示,哮喘是遗传和环境因素作用的结果,或者说是固有免疫系统和获得性免疫系统相互作用的结果。所以,研究哮喘病因学中两个免疫系统间的相互作用,将会有助于进一步明确哮喘的病因和发病机制。近年来,室内灰尘、内毒素、病毒感染等在哮喘气道炎症中的作用越来越受到关注,室内灰尘(HDM)是存在于周围环境中的一类重要的病原微生物成分,我们试图运用HDM干预小鼠哮喘模型,研究HDM通过TLR4信号转导途径诱导肺泡巨噬细胞(AM)活化,探讨TLR4激活进而诱导AM的活化在哮喘小鼠气道炎症中的作用,从而更加深入明确哮喘的病因和发病机制。研究方法：雌性BALB/c小鼠30只,随机分为哮喘模型组(OVA) A, HDM处理组(100mg/L HDM+OVA) B和对照组(生理盐水)C。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立小鼠哮喘模型；苏木素伊红(HE)染色观察小鼠气道及肺组织病理变化；光学显微镜下观察小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的含量；实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定AM的TLR4的表达,流式细胞技术(FCM)检测AM的CD80、CD86的表达。统计学分析：检测结果均以均数±标准差(x-±s)表示,采用SPSS13.0统计软件处理,各组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD法,P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.小鼠哮喘模型成功建立的临床表现以小鼠出现明显的烦躁不安,活动频繁,呼吸急促,腹肌抽搐,大、小便失禁,毛发竖起,部分小鼠出现反应迟钝,动作迟缓等为哮喘成功的标志。2.HE染色观察小鼠肺组织病理学改变。高倍显微镜下观察可见,A组支气管黏膜下水肿,黏液腺增生,黏膜及黏膜下层、平滑肌外均可见大量以嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润；B组肺泡隔断裂,肺间质充血。肺泡腔内中性粒细胞和淋巴细胞大量浸润；C组气道上皮无增厚,气道周围无炎症细胞浸润,肺泡壁结构完整。3.各组小鼠BALF中炎症细胞的表达水平与A组相比,B组细胞总数、中性粒细胞水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),而嗜酸性粒细胞差异无统计学意义(P>0.05)。4.各组小鼠BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ的表达水平A组BALF上清中IL-4、IL-5、IL-13和IFN-γ水平显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.05),B组BALF上清中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著高于A组(P<0.05),而IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05)。5.各组小鼠AM的TLR4的表达水平与A组相比,B组AM的TLR4mRNA的表达能力显著增强,差异有统计学意义(P<0.05),而A组与C组AM的TLR4mRNA表达能力差异无统计学意义(P>0.05)。6.各组小鼠AM中CD80、CD86的表达水平与A组相比,B组CD80分子表达差异无统计学意义(P>0.05),CD86表达能力显著增强(P<0.05)。结论：1.AM的TLR4是介导HDM引起免疫应答和机体炎症的主要受体,HDM可诱导哮喘小鼠AM的TLR4mRNA的表达上调,而OVA并不能刺激TLR4表达增强。2.CD86协同Th2的产生,促进体液免疫,下调细胞免疫,Th2细胞克隆的产生及炎症介质的释放更加依赖于CD86/CTLA4相互作用所提供的共刺激信号。3.HDM通过AM的TLR4的高表达诱导AM的活化,加重哮喘的气道炎症。意义：我们通过HDM干预小鼠哮喘模型,进一步明确了HDM通过TLR4信号转导途径诱导AM活化,以及TLR4激活进而诱导AM的活化在哮喘小鼠气道炎症中的作用,从而更加深入明确了哮喘的病因和发病机制。