草鱼呼肠孤病毒人工感草鱼的条件筛选和病理学研究

• 作 者: 肖雪
• 机 构: 四川农业大学
• 出 处: 四川农业大学
• 发表日期: 2007年期
• 关键词: 草鱼出血病 病理模型 病理及超微结构 草鱼呼肠孤病毒

草鱼呼肠孤病毒（GCRV）是呼肠孤病毒科，水生呼肠孤病毒属的病毒中毒力最强的病毒，严重危害着我国淡水渔业的养殖。20世纪90年代，我国在国际上首次完成GCRV全基因序列分析，是我国迄今研究最深入的水生呼肠孤病毒。将购买的GCRV873经过细胞传代后，测定其TCID₅₀为10^-3.881／100ul，病毒滴度比文献报道的滴度减少了5个数量级，但该毒株经过细胞传代后，细胞病变效应出现的时间由原来的72h左右缩短到了50h左右，毒价逐步趋于稳定。在人工感染病毒的试验中，细胞培养的病毒最初在草鱼体内不能致病，在确定病毒的注射量和感染温度为5*TCID₅₀和25℃-26℃后，通过在鱼体上传5代后，出现了明显病变，临床症状主要是红肌型为主的病变，用出现明显症状的草鱼内脏制作病毒液人工感染草鱼进行正式试验。病毒感染草鱼后第4天开始发病，第7天达到死亡高峰，之后进入转归期。感染病毒的鱼初期表现出特征性的“应激性出血症”，鳃盖、腹部和嘴部出现明显的充血发红。患病草鱼皮肤、肌肉、鱼鳍基部发红、充血、出血。该病毒主要导致各脏器的严重出血、失血，最后各脏器的严重贫血，各脏器的贫血又反之导致了器官的坏死、变性。病理学观察表明：肾小管上皮细胞空泡变性、坏死，血管壁被破坏，血细胞外渗；肝脏细胞空泡变性，崩解脱落；脾脏局灶性坏死；心肌和骨骼肌纤维肿胀、变性，纤维断裂，蜡样坏死，同时可见出血；肠腔积液，轻微水肿，肠绒毛少量脱落。超微病理研究表明：病毒粒子主要存在于肾脏血管内皮细胞的细胞质中，其它组织器官中未见病毒粒子。肾病变最严重，肾小管血管内皮细胞线粒体极度肿胀、嵴断裂、溶解。肝脏内皮细胞、肌肉细胞中的线粒体轻度水肿、嵴断裂、溶解。