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龙血竭(Dragonsblood)是一种传统名贵中药,有着广泛的医疗用途,它形成于龙血树的木质部,是龙血树在受到伤害时分泌的一种树脂。龙血树生长极其缓慢,传统的采脂方法对龙血树资源浪费严重,树体不能重复利用。随着对龙血竭的研究越来越广泛,市场对龙血竭的需求量日益增大,龙血树资源成为限制龙血竭产业发展的关键问题。
自然状态下龙血树树叶生长相对较快,而且每年都会衰老枯死一批,如果利用龙血树树叶诱导生产血竭,既可以不破坏资源,又可以重复利用珍贵的龙血树,有望解决龙血竭可持续供应和龙血树资源紧张的局面。
微生物对龙血树树干形成血竭有促进作用,确定微生物对龙血树树叶是否也有同样的诱导效果是本项研究的主要内容。
本文从剑叶龙血树(Dracaenacochinchinensis)树叶上分离出30株微生物,连同本实验室保存的从剑叶龙血树树干上分离出的、对树干有良好诱导效果的4个菌株做叶片回接实验。确定了3株从叶片上分离的真菌和4株对树干有诱导产脂效果的真菌有诱导叶片产脂的活性,分别为YIM-A15,YIM-A9、YIM-B5、YM-266、YM-71213、YM-6113和YM-2617,以菌株YM-71213诱导效果最为显著。几乎所有6个月叶龄的叶片都能被真菌诱导,60-70%的一年生叶片能被诱导,而两年叶龄的老叶片无法诱导产脂。对真菌诱导产生的红色树脂提取后进行了TLC(薄层色板)分析、HPLC(高效液相色谱)分析、抗菌实验、抗氧化实验和黄酮类成分的呈色反应以及总黄酮的含量等分析。发现在龙血树叶片上诱导出来的红色树脂具有和树干血竭以及药厂血竭相似的成分和生物活性。叶源血竭的黄酮含量、抗氧化活性和抗菌活性还高于树干血竭。
通过形态特征和分子特征等手段,从龙血树树叶上分离的YIM-A15,YIM-A9和YIM-B5这三株菌都被鉴定为胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides),YM-266和YM-71213被鉴定为层出镰刀菌(Fusariumproliferatum),YM-6113和YM-2617被鉴定为尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)。
本项研究结果为我们提供了一条寻找血竭替代品的新思路,也为我们研究血竭的形成机制提供了新途径。叶源血竭的深入开发有望解决龙血竭的资源严重紧张的局面。