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背景与目的:帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是一种常见的中枢神经系统变性疾病之一,其病因和发病机制尚不完全清楚。近年来越来越多的证据表明炎症是介导黑质多巴胺(Dopamine, DA)能神经元变性及死亡的决定性因素,以小胶质细胞激活为特征的神经炎症在PD发病机制中起重要作用。小胶质细胞激活介导的炎症反应对DA能神经元损伤具有启动作用,激活后的小胶质细胞释放大量的促炎症反应因子、细胞毒性因子、超氧化物、反应性氧自由基等,导致线粒体功能紊乱,并产生氧化应激、兴奋性毒素作用等为主的级联反应,这一病理过程促进了PD的缓慢进展。环氧化酶( Cyclooxygenase, COX)是花生四烯酸代谢产生前列腺素(Prostaglandin, PG)过程的主要限速酶,COX同工酶之一COX-2是一种重要的炎症介质,炎症反应伴随COX-2表达增加与许多神经疾病的病理过程中神经元的变性和凋亡有关。因此针对PD抗炎治疗的研究成为近年来PD的研究热点之一。选择性COX-2抑制剂-塞来昔布(Celecoxib, CB)及中药青藤碱(Sinomenine, SN)可阻断COX-2介导的酶促反应,抑制胶质细胞激活为主的炎症反应,从而对DA能神经元起神经保护作用。但是研究PD炎症机制的理想模型-脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)诱导的DA能神经元变性中COX-2的作用尚不完全清楚,COX-2是否确实介导了DA能神经元的炎症损伤,选择性COX-2抑制剂是否抑制该损伤途径,亦不完全清楚。本研究通过黑质内注射LPS制作PD动物模型,应用CB和SN对实验动物进行干预,采用免疫组织化学及免疫印迹技术等观察PD大鼠黑质DA能神经元损伤、COX-2蛋白表达的变化及二者相关性;同时观察CB和SN对黑质DA能神经元的保护作用,探讨COX-2在炎症介导的DA能神经元变性中的作用及抗炎药物的神经保护机制。为明确导致黑质DA能神经元死亡的分子通路,寻找新的治疗方法提供实验依据。迄今为止,相关研究国内外鲜有报道。材料和方法:48只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、PD组、CB组和SN组。黑质内立体定向注射5ug LPS或PBS,CB、SN及PD组在注射LPS前3h开始灌胃,剂量分别为20ml/kg/d、30ml/kg/d,PD组灌等量生理盐水,持续到注射后14d。实验终点腹腔内注射阿朴吗啡(Apomorphine, APO)来观察大鼠行为学变化,采用免疫组织化学染色法检测大鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase, TH)及COX-2的阳性细胞数,并观察小胶质细胞的形态学变化;免疫印迹法检测黑质TH及COX-2蛋白的表达情况。结果:实验各组大鼠在阿朴吗啡注射后均可诱发向右侧旋转行为,对照组无任何行为学变化。PD组大鼠行为学变化最明显,30min平均旋转圈数为196.90±9.52,CB组及SN组30min平均旋转圈数分别为109.30±9.38、98.79±8.81,与PD组相比,旋转圈数明显减少(P<0.01)。与对照组相比,PD组注射侧TH阳性细胞数明显减少,TH蛋白表达亦明显下降(P<0.01);同时,其黑质COX-2阳性细胞数增多,COX-2蛋白表达亦增高(P<0.01),且大部分小胶质细胞呈“阿米巴样”激活状态。CB组、SN组较PD组黑质TH阳性细胞数增多, TH蛋白表达亦增高( P<0.01);COX-2阳性细胞数减少,COX-2蛋白表达下降(P<0.01),且激活状态的小胶质细胞减少。CB组与SN组组间比较,SN组TH阳性细胞数及TH蛋白表达增加, COX-2阳性细胞数及COX-2蛋白表达下降,差异显著(P<0.05)。可见,CB和SN能抑制COX-2表达上调,保护DA能神经元,并且明显抑制小胶质细胞激活。结论:LPS可诱导大鼠黑质小胶质细胞激活、COX-2表达增加、使TH阳性DA能神经元数量减少,TH表达下降。选择性COX-2抑制剂塞来昔布及中药青藤碱可抑制小胶质细胞激活、抑制COX-2表达,对TH阳性DA能神经元有明显的保护作用,可能成为有效的PD治疗药物。