论文部分内容阅读
本文将含有htert全长编码框的表达载体(pGRN145)转染到NPC细胞B6克隆株(NPC-B6)中,经筛选获得了4个克隆,分别命名为B6Tert-1、B6Tert-2、B6Tert-3、B6Tert-4;其中B6Tert-1的形态特征与母本细胞最接近。本研究则致力于鉴定B6Tert-1细胞的遗传和生化特性,探讨细胞是否能够永生化,并通过研究细胞中调控G1/S和G2/M细胞检验点的细胞周期蛋白、蛋白激酶及其相关抑制因子的表达变化,以阐明端粒酶诱导细胞滋养层细胞永生化过程中对细胞增殖调控的调节;同时研究了B6Tert-1细胞的凋亡特性及凋亡相关蛋白的变化,初步探讨了端粒酶对细胞滋养层细胞凋亡的影响。
本工作通过对外源导入htert基因所建立的永生化人细胞滋养层细胞系(B6Tert-1)的生化功能和增殖特性的鉴定,证实该细胞保持了人类正常细胞滋养层细胞的多种特性;进一步对该细胞永生化机理的研究表明,外源导入htert基因激活细胞内端粒酶活性,一方面延长细胞的端粒,另一方面,通过对细胞周期相关蛋白的调控加速细胞跨越G1/S以及G2/M细胞检验点,由此促进细胞的增殖。此外,端粒酶激活还改变了滋养层细胞的凋亡特性。上述研究表明B6Tert-1细胞是研究人滋养层细胞行为和功能调节的理想细胞模型,其永生化机制的阐明为这一细胞滋养层细胞的推广使用提供了坚实的理论依据,并将有助于滋养层细胞相关肿瘤发生机制的研究。