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目的: 观察5/6肾切除SD大鼠术后不同时间点肾组织中ACE2蛋白和mRNA的动态变化规律,分析其与肾功能的相关性,寻找血管紧张素1-7[Ang(1-7)]的干预时间点。 方法: 4~6周龄雄性SD大鼠75只,适应性喂养一周后,处死5只留取标本,检测结果作为基础值。其余70只随机分为两组:假手术对照组(Sham组)和5/6肾切除组(5/6STN组)各35只。假手术组游离肾包膜后,仅暴露肾脏,逐层缝合;手术组先切除左肾的上下极,总量占左肾的2/3,一周后切除右肾,造模完成后,两组分别于术后2周、4周、6周、8周、10周、12周、14周处死,共七个亚组,每组5只。下腔静脉取血留取血清测定血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)。光镜观察肾组织形态学的变化。RT-PCR法检测肾组织ACE2 mRNA/β-actin mRNA相对含量。免疫组化检测各组肾组织ACE2蛋白的光密度值。结果用SPSS13.0统计软件进行分析,方差齐性检验采用Levene检验,计量资料采用单因素方差分析,两两比较方差齐者采用LSD,方差不齐者采用Tamhanes T2,用Persons相关分析P<0.05提示有显著性差异。 结果: 1.5/6肾切除组肾脏病理改变:残肾体积增大,质地硬韧,缺乏光泽,有的呈褐色或暗红色,手术切口疤痕形成,形状呈不规则球形,包膜增厚与脾脏或肠管黏连不易与肾组织分离,切面肾皮质明显变薄,皮髓质分界不清。光镜下,手术8周以后出现部分肾小球硬化,小球系膜细胞增生,系膜基质增多,部分肾小管萎缩和间质纤维化病变,随着时间的延长,肾小球硬化和间质纤维化所占的比例逐渐增加。假手术组肾脏改变轻微,无系膜细胞增生,系膜基质无增多,未见小球硬化。 2.5/6肾切除组肾功能改变:与Sham组比较,STN各亚组血BUN和Scr均明显升高(P值<0.01和<0.05);假手术组血BUN和Scr值与同组其它时间点比较均无统计学意义(P>0.05)。术后2周组的血BUN明显高于5/6肾切除术后4周和术后6周时间点亚组,差异有统计学意义(P<0.05);术后12周血BUN升高与手术组其他亚组组其它时间点比较有统计学意义(P<0.05)术后2周组Scr明显高于5/6肾切除术后4周、6周、8周和10周等时间点亚组,差异有统计学意义(P<0.05);假手术组尿素氮值与同组其它时间点比较无统计学意义(P>0.05)。手术组肌酐术后2周升高明显,与同组其它时间点比较有统计学意义(P<0.05),术后12周肌酐手术组其他亚组比较有统计学意义(P<0.05)。假手术组肌酐值与同组其它时间点比较无统计学意义(P>0.05)。假手术和手术组肌酐比较有统计学意义(P<0.01)。 3.手术组肾组织ACE2蛋白的改变:与其它手术亚组比较,肾组织ACE2蛋白的光密度值在术后2周时明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),4周、6周、8周、10周时的ACE2蛋白的光密度值变化无统计学意义。12周时光密度值降低有统计学意义P<0.05。假手术各亚组肾组织ACE2蛋白的光密度值改变无统计学意义。假手术组与手术组术后2周、4周、6周、8周、10周、12周、14周时的ACE2蛋白的光密度值比较有统计学意义(P<0.05)。 4.手术组肾组织ACE2 mRNA/β-actin mRNA的变化:手术组肾组织ACE2mRNA/β-actin mRNA的相对含量以术后2周最强,与其它手术亚组比较有统计学意义(P<0.01),4周、6周、8周、10周、12周、14周时的ACE2 mRNA/β-actinmRNA的变化?12周减低且与其它手术亚组比较有统计学意义(P<0.05),假手术组各组ACE2 mRNA/β-actin mRNA相对含量差别无统计学意义(P>0.05)。假手术组与手术组之间比较有统计学意义(P<0.05)。手术组与假手术组在2周、4周、6周、8周、10周、12周和14周时的ACE2 mRNA值比较均有统计学意义(P<0.05)。 5.手术组血肌酐与手术组肾组织ACE2免疫组化光密度值呈负相关(r=-0.346,P=0.043); 6.手术组肾组织ACE2免疫组化光密度值与肾组织ACE2 mRNA的表达呈正相关(r=0.452,P=0.007)。 结论: 1.在5/6肾切除大鼠模型中,随着肾脏病变的加重ACE2表达逐渐减少,提示5/6肾切除大鼠肾功能与ACE2负相关; 2.5/6肾切除大鼠模型肾组织的ACE2在术后2周反应性增加,12周时明显减少; 3.5/6肾切除大鼠模型术后12周时进行药物干预比较合适。