【摘 要】
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该研究论述了梅毒螺旋体重组抗原TpN17和TmpA的克隆、表达及纯化,并依此建立了酶联免疫吸附试验.1.梅毒螺旋体重组抗原TpN17的克隆和表达; 用聚合酶链式反应(PCR)扩增出目的T
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该研究论述了梅毒螺旋体重组抗原TpN17和TmpA的克隆、表达及纯化,并依此建立了酶联免疫吸附试验.1.梅毒螺旋体重组抗原TpN17的克隆和表达; 用聚合酶链式反应(PCR)扩增出目的TpN17基因.2.梅毒螺旋体膜蛋白抗原TmpA的克隆和表达;扩增的目的TmpA基因长1038bp.将纯化的目的基因插入到载体pQE-30,然后转化至大肠杆菌M15中,经IPTG诱导后产生分子量约为39千道尔顿的目的TmpA蛋白.3.建立重组TpN17和TmpA抗原酶联免疫吸附试验(ELISA); 经亲和层析纯化后的重组蛋白TpN17和TmpA混合包被微量反应板,加入适量的阳性和阴性对照及病人血清,然后加抗人IgG(γ链)酶结合物,最后加底物显色.该研究表明,由TpN17和TmpA梅毒螺旋体重组抗原建立的ELISA灵敏度和特异性均较高,可用于梅毒诊断.
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