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穿孔线虫属线虫(Radopholus)是重要的植物病原线虫,防治和检疫工作需要对该属线虫进行准确快速的鉴定。本研究对该属的分类进行了系统的整理,在此基础上,从单异体繁殖、形态学、分子生物学和致病性四个方面研究并记述了穿孔线虫属的一个新种,番禺穿孔线虫Radopholus panyuensis sp.n.。
通过对穿孔线虫属分类资料的系统收集、整理和分析表明,截止2011年,穿孔线虫属已报道的种名有39个,其中1个为疑问种,有效种为38个,本文记述的新种1个。
番禺穿孔线虫Radopholus panyuensis sp.n.,2010采集于广州番禺观赏花卉孔雀竹芋上,经过大量纯化培养,雌虫较多,雄虫少见。该新种的主要鉴别特征是:雌虫:热杀死后虫体向腹面弯曲,有的标本尾部略向背弯曲。在光学显微镜下,体环显著,细密。唇区稍微缢缩,或不缢缩,前端平,唇骨架发达,唇环2个。头感器位于宽叶状侧唇瓣上,侧唇瓣边缘突出,位于第一唇环末端。雌虫口针较粗壮,口针基部球圆球状,稍向后突。在光镜下中食道球,圆形或卵圆形,发育良好,瓣膜清晰可见。食道腺背叶和侧叶覆盖肠的前端。阴门前部侧区侧线5-6条;阴门区侧区侧线愈合为4条;距头部70-80体环处侧线开始愈合成3条,距头部10环左右侧线消失;侧线于尾部愈合为三条,在接近尾末端8-10环处消失;不规则网纹贯穿整个侧区。尾部长圆锥形,渐细,末端圆至几乎指状,环纹至尾末端。透明区9-11μ m,其上有环纹。雄虫虫体较雌虫细长。头部缢缩,球形,唇环2个。口针细长基部球细小。侧区侧线5-6条。交合伞延伸至尾部1/3处,很少到达1/2处。尾部末端有的有凸起。
笔者研究比较了大量线虫的DNA提取法和单条线虫切割的DNA提取法,在此基础上,设计了一种提取线虫DNA的新方法,实验显示操作简便,成功率高,效果好。本研究对番禺穿孔线虫Radopholus panyuensis sp.n.线虫的ITS序列进行了PCR扩增。PCR产物经测序并提交NCBI数据库,获得登录号:JF927287,序列检索和聚类分析结果显示,NCBI数据库中与该序列最相似的序列的最大相似度仅为89％,为Radopholus similis(HM469459.1)序列,从分子生物学角度印证了此线虫是穿孔线虫属的一个新种。
接种试验结果显示,番禺穿孔线虫不能在香蕉和柑桔根部繁殖,孔雀竹竽也不是番禺穿孔线虫的最适合寄主,从生物学角度证明了此种不是与其形态最相近的相似穿孔线虫Radopholus similis,从寄生特性角度印证了此种为穿孔线虫属的一个新种。