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胚胎植入涉及到一系列复杂的信号传导过程,从内皮细胞黏附配体的获得,到母胎界面促血管生成因子的分泌,各个环节对于妊娠的确立都是至关重要的;而研究证明,在这个复杂的作用网络中,大量信号传递分子可能协同卵巢激素共同参与母体与胎体之间的相互作用,其中包含了白血病抑制因子LIF,肝素样血管生成因子HB-EGF等等各种细胞因子,它们在妊娠早期的胚胎发育,子宫蜕膜化以及胚胎植入过程中都起着重要作用。CYTL1(C17, C4orf4, Cytokine-like protein 1.UNQ1942/PRO4425)最初在文献报道是作为一种分泌蛋白,CYTL1的mRNA主要表达于骨髓或脐带血获得性CD34+细胞,而CD34-细胞中未见,同时CYTL1基因在癌前病变期的前列腺基质细胞中有显著高表达,而且CYLT1能够促进小鼠间充质干细胞的软骨定向分化,后来的报道也纷纷一致地支持了CYTL1对软骨生成的促进与保护作用,；根据CYTL1序列和空间结构,CYTL1很可能具有类似趋化因子CCL2空间折叠结构,并且通过与趋化因子受体CCR2配体结合以完成信号转导,由此推测,在功能上,CYTL1蛋白很可能也具备与CCL2一样,在生理过程中起着一定的免疫与生长调控作用,到目前为止,对CYTL1的研究范围还非常局限,CYTL1在生殖免疫学,或胚胎植入过程中的作用仍未见报道。[目的]本研究通过对CYTL1在小鼠妊娠以及人类月经周期的不同阶段的表达和调控的研究,进一步探讨CYTL1在胚胎植入过程中存在的作用,为阐明CYTL1在生殖中的功能提供了一定的理论依据。[方法]1.建立小鼠妊娠模型,通过RT-PCR方法检测小鼠妊娠周期不同阶段子宫内CYTL1的表达。2.应用Real-time PCR, RT-PCR方法检测CYTL1在不同细胞的表达水平。3.应用RT-PCR, ELISA方法检测月经周期CYTL1的表达。4.应用CCK8方法检测CYTL1对子宫内膜细胞系增殖的影响。5.应用RT-PCR方法,ELISA方法检测CYTL1对LIF、HB-EGF, CD82表达的调控。6.建立体外着床模型,观察CYTL1在胚胎绒毛膜细胞与子宫内膜细胞之间黏附的影响。[结果]1.应用RT-PCR方法检测CYTL1在未妊娠以及妊娠1.5d小鼠子宫内几乎不表达,而CYTL1表达于妊娠4.5-8.5d小鼠子宫内,并且在妊娠4.5-6.5d(胚胎植入期)小鼠子宫内CYTL1的表达水平显著增高。2.应用Real-time PCR,RT-PCR方法检测HEC-1-A, RL952, JAR细胞内表达,相比于胚胎绒毛膜细胞JAR,子宫内膜细胞系HEC-1-A/RL95-2显著高水平表达CYTL1,同时HEC-1-A细胞高水平表达LIF,HB-EGF这类与着床密切相关的细胞因子,CYTL1在HEC-1-A细胞内表达水平显著高于RL95-2细胞内。3.应用RT-PCR, ELISA方法检测月经周期CYTL1的表达,50uM和10分M孕酮和雌二醇能够明显促进HEC-1-A/RL952细胞的表达水平。4.应用CCK-8检测子宫内膜细胞的增殖情况,如同孕酮一样,CYTL1能明显促进子宫内膜细胞的增殖。5.应用RT-PCR方法,ELISA方法检测LIF, HB-EGF的表达,CYTL1能明显促进子宫内膜细胞内LIF, HB-EGF, CD82的表达。6.在体外着床模型中,CYTL1能明显增强子宫内膜细胞HEC-1-A/RL95-2与胚胎绒毛统统膜细胞JAR之间的黏附,提高JAR细胞黏附率。[结论]1, CYTL1在妊娠早期胚胎植入期小鼠子宫内表达水平呈现峰值,同时CYTL1 mRNA和蛋白仅表达于子宫内膜细胞,而在胚胎绒毛膜细胞内几乎不表达,而且与多种着床因子一样,CYTL1高水平表达于HEC-1-A细胞内,说明CYTL1可能在胚胎着床过程中作为调控因子。2,孕酮和拾-雌二醇能够促进CYTL1在子宫内膜细胞中的表达,孕酮和雌二醇是促进子宫内膜蜕膜化的重要因素,而子宫内膜蜕膜化对胚胎植入、妊娠建立与维持具有重要作用,CYTL1在子宫内膜蜕膜化过程中高水平表达,这说明CYTL1在子宫内膜中的表达有利于胚胎植入以及妊娠的建立。3, CYTL1能促进子宫内膜细胞的增殖,而子宫内膜增殖是子宫内膜蜕膜化过程中的重要步骤,CYTL1可以促进子宫内膜蜕膜化的调节因子4, CYTL1能促进LIF, HB-EGF, CD82在子宫内膜细胞中的表达,而LIF, HB-EGF, CD82是在胚胎植入的定位,粘附和植入过程中的重要调节因子,而CYTL1促进胚胎植入相关细胞因子的表达,这说明CYTL1在胚胎植入过程中发挥调节作用。5, CYTL1增强子宫内膜细胞与胚胎绒毛膜细胞之间的黏附能力,提高胚胎的黏附率,CYTL1可以促进胚胎在子宫内膜中的着床。