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前言 眼前节碱烧伤在化学性眼外伤中发病率高、损伤重、预后差。其病理改变特征是大量的多形核白细胞浸润，继而引起一系列组织损伤，病变原因从它出现的时间和组织学改变来看，不完全是碱的直接损害造成的。碱烧伤后局部严重的营养不良，使胶原合成的质和量都下降，并能启动胶原酶释放，加速了角膜溃疡的发生。总之，角膜碱烧伤病理机制复杂，烧伤后尽快建立促进角膜上皮层修复的微环境，恢复健康、完整的角膜上皮是治疗的关键之一。前苏联学者Макаров．П．Г等应用膜透析方法治疗急性细菌性角膜炎，取得良好的临床效果。这种方法较胶原膜、角膜接触镜更具有优点，膜透析就仿佛为患眼提供一个生物膜性角膜接触镜，使得上皮细胞在其包盖保护下增殖、生长。它不仅是伤口的绷带，而且是药物传送装置。本实验应用膜透析方法治疗兔眼前节碱烧伤，目的是评价膜透析方法的临床应用前景，探索碱烧伤的有效的、新的治疗方法。 实验材料 1．实验动物：2.0-2.5公斤重大耳白家兔45只，由中国医科大学动物部提供。 2．实验材料：0号造牙粉，人胎盘羊膜，100％甘油，葡萄糖盐水，维生素C注射液，庆大霉素注射液，2％荧光素钠，输液器等。 3．实验仪器：Olympus光学显微镜，电子显微镜，美国产血糖仪，日本产日立牌冰箱。 实验方法 一、膜透析器的制作 ＊透析器支架的制作：配制藻酸盐，以半球形物为模具制备藻酸盐阳模及阴模对号造牙粉注人模具，凝固后打磨成型。 又透析膜的制备：取产前血清学检查正常的剖宫产胎盘羊膜，含庆大霉素的生理盐水冲洗干净后，平铺于硝酸纤维素滤纸块上，二皿％甘油冰箱保存。 3．透析液的配制： 参照MaKapOB法：葡萄糖盐水500毫升 维生素C注射液5．0克 庆大霉素注射液4万单位 二、碱烧伤模型的制作 大耳白家兔45只，按每公斤体重0．二毫升肌注速眠新麻醉，开睑器开睑。将浸有ZN氢氧化钠溶液、直径为8．0毫米的硝酸纤维素滤纸片，置于实验兔右眼角膜中央，1分钟后取下，用生理盐水冲洗2分钟。 三、烧鹏实验组用膜透析方法治疗 将45只烧伤兔随机分成3组。实验组15只兔，每日 2次，每次1小时膜透析治疗3天，每日1次，每次1小时透析治疗1二天；对照1组15只，每日透析液点眼再次；对照三组15只于烧伤后再小时内行羊膜移植手术治疗。 四、角膜荧光染色及形态学观察 于烧伤后每日治疗前做角膜荧光染色，观察角膜上皮愈合情况。羊膜移植组未行荧光染色。数码相机拍照典型病变，计算机图形分析系统分析角膜荧光着色面积。分别于治疗后3天＊天、15天处死实验组、对照组各5只兔，切取角膜，制成光镜、电镜标 ·2·本，观察其形态学改变。 五、房水中葡萄糖含量检测分析 动物处死前于角膜缘处行前房穿刺，抽取房水0．l－0．2毫升，置于微量试管冰冻保存。美国产血糖仪检测房水葡萄糖含量。结果行Sindent吐检验，P＜0．05为具有统计学显著性差异。 结 果 一、角膜荧光染色及形态学观察 1．角膜荧光染色观察：前3天时实验组和对照互组荧光着色医无明显差别沙＞o．05人5－7天时，实验组呈不规则、椭圆形荧光着色区而对照 1组呈均匀较厚的荧光着色区。12－15天时，实验组角膜荧光染色，点状、线状着色，对照 1组溃疡状深荧光着色区。荧光着色面积实验组小于对照1组u＜0．俄人 2．光学显微镜观察：3天时，实验组和对I照组角膜均只有二一2层上皮细胞，对照 11组上皮和基质层之间有明显的分离带。7天时，实验组可见2－3层上皮细胞，胶原纤维轻度扭曲变形。对照透析液点眼组上皮缺失，或局部可见零碎上皮，胶原纤维间空隙较大．局部断裂；羊膜移植组可见上皮层空泡状变性，上皮层和基质层间可见明显的分离带。15天时，实验组可见4－5层上皮细胞，实质层明显呈增生状态，未见新生血管增生。对照透析液点眼组角膜上皮层局部缺失，实质层可见大量白细胞浸润，伴新生血管增生；羊膜移植组上皮层大部分完整，基质层大量白细胞浸润，新生血管化。 3．透射电子显微镜观察：3天时，实验组娜质中可见大量水肿扩张的粗面内质网，而对照组细胞内结构消失，呈空泡样改变，对照11组上皮层可见均匀致密宽带，未见上皮样结构。7天时，实 ·3·验组可见二一3层扁平状上皮细胞，细胞间连接松弛，而内皮层可见胞浆丰富的细胞和空泡状变性的细胞并存，细胞间被大量网状组织填充。对照1组未见上皮样结构，内皮细胞大量空泡样变性，仅残存细胞间增生的网状结构，对照 11组可见大量变性的无结构的空泡样细胞。15天时，实验组上皮细胞间连接紧密，可见大量桥粒连接，表层细胞纤毛样突起形成。对照I组上皮层缺失，胶原纤维间可见大量白细胞。对照二组基质层血管样结构周?