论文部分内容阅读
目的:探讨HBV携带者的中医虚实证与PD-1/PD-L1表达的关系，为HBV携带者中医临床诊疗提供理论依据。
方法:收集2012年6月至2013年4月龙华医院门诊HBV携带者60例，健康体检者18例作为对照组。收集两组血清HBV-DNA定量、肝功能、两对半、HBV患者症状及舌苔脉象，填写临床病例观察表。并分别采集两组外周血，收集血清;分离外周单核和细胞，然后经IL-12刺激培养外周单个核细胞，收集细胞培养上清;免疫印迹法检测外周单个核细胞PD-1/PD-L1的表达;ELISA检测血清及细胞培养上清液中细胞因子IL-2、IFN-γ的表达水平。首先比较HBV携带组与健康对照组，细胞因子水平及外周单个核细胞PD-1/PD-L1蛋白表达水平。其次根据采集的四诊资料对HBV携带者进行中医辩证分型，分为虚证和实证两个证型，进而分析HBV携带组虚、实两证患者血清IL-2，IFN-γ表达水平，及与HBVDNA载量的关系，并分析虚、实两证与PD-1/PD-L1表达水平的关系。最后比较HBV携带者虚、实两证患者外周单个核细胞经IL-12刺激与未刺激的PD-1/PD-L1蛋白表达水平。结果采用SPSS16.0统计软件进行分析。
结果:
1.HBV携带组与健康对照组间的比较
1)HBV携带组血清IL-2、IFN-γ表达水平低于健康对照组（P＜0.05）。
2)HBV携带组与健康对照组比较表现为，PD-L1蛋白表达水平上调(P＜0.05);PD-1蛋白表达水平有上调趋势但无统计学意义（P＞0.05）。
2.HBV携带中医辨证分型分为虚证和实证，其中虚证36例(60％)，实证24例(40％)，HBV携带者以虚证为主;
3.HBV携带组虚、实两证间的比较
1)HBV携带组实证患者血清IFN-γ、IL-2水平高于虚证患者，P值分别为0.001、0.006。
2)HBV携带组实证患者HBV-DNA检出率高于虚证组(P＜0.05)。
3)HBV携带组实证患者外周单核细胞PD-1、PD-L1蛋白表达水平和虚证比较有上调趋势，但无统计学意义（P＞0.05）。
4.IL-12刺激后，HBV携带组蛋白、细胞因子的变化情况
1)IL-12刺激后，虚证其PD-1、PD-L1高于未刺激，但无统计学意义(P＞0.05);刺激后的实证其PD-L1低于未刺激（P＜0.05），但PD-1下调无统计学意义(P＞0.05)。
2)IL-12刺激后，HBV携带组细胞培养上清液中IFN-γ、IL-2的水平上调，其中IL-2上调有统计学意义，P＜0.05。
结论:
1.HBV携带者中医虚实证与PD-1/PD-L1表达关系为:HBV携带者实证PD-1、PD-L1蛋白表达水平与虚证比较有上调趋势。
2.HBV携带者中，实证患者较虚证患者免疫反应性更强，表现为:实证患者血清IFN-γ、IL-2水平高于虚证;实证患者外周单个核细胞经IL-12刺激后，其PD-L1蛋白水平表达下调。