人类心脏发育候选基因ZNF649的克隆与功能研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FANSHENGHUA2009
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  一系列控制着细胞分化,细胞基质形成的基因在不同的时空表达构成了心肌的分化过程。研究证实许多包含有KRAB的锌指蛋白(KRAB-ZFPs)与心脏发育以及心血管疾病都有密切的关系。本文作者筛选并鉴定出一个新的人类锌指基因并命名为ZNF649,其cDNA全长3176个碱基,编码一个长505个氨基酸残基的蛋白质。ZNF649在N端含有一个KRAB框,C端含有10个C2H2型锌指。使用生物信息学的方法分析表明ZNF649定位在染色体19q13.41上,在基因组上跨越了17kb并包含了5个外显子。   RNA印迹试验表明ZNF649在人的成体和胚胎中都有表达,而在心脏和骨骼肌中表达强烈。ZNF649融合Gal-4的DNA结合区并与VP-16共转染的试验结果表明ZNF649是一个抑制因子,在COS7细胞中过表达ZNF649蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子AP-1和SRE的转录激活活性显著下降。将ZNF649基因中的结构域拆片进行分析的试验表明KRAB基元是个非常重要的结构域,抑制了SRE和AP-1的转录活性。这些结果表明,ZNF649蛋白很可能在MAPK的信号途径中充当了转录抑制子的角色,进而在细胞分化中起了重要的作用。   另外,本文还以鸡胚早期发育各时期的心脏为材料,建立了一套快速鉴定鸡胚发育时期的形态学标准,而且还将鸡胚心脏发育的关键事件与鸡胚发育时期各关键形态学特征联系起来,使得可以通过鸡胚外部形态学特征来快速确定心脏发育的时期。
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