小鼠软骨内成骨过程中软骨细胞发育与淋巴管生长的研究

来源 :华中师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:juannayuan
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研究目的:本论文通过观察软骨细胞Ⅱ型胶原,以研究软骨细胞在软骨内成骨过程中的发育情况,并通过检测淋巴管内皮细胞标志物LYVE-1与促淋巴管生长因子VEGF-C的表达,阐明软骨内成骨过程中VEGF-C对软骨成骨过程中淋巴管生长发育的影响,并分析了淋巴管与软骨内成骨的关系,并为软骨内成骨过程以及生长软骨损伤的修复提供理论参考,也对青少年骨的健康发育有着积极意义。研究方法:取昆明小鼠第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19天日龄仔鼠的双侧股骨,采用HE染色法观察股骨软骨发育过程中软骨细胞形态变化和血管侵入情况,运用免疫组织化学法观察股骨中Ⅱ型胶原、LYVE-1的表达情况,利用RT-PCR检测Ⅱ型胶原、LYVE-1和VEGF-C表达。研究结果:1.股骨生长发育过程表现为软骨内成骨,仔鼠出生前股骨初级骨化中心已形成,次级骨化中心尚未形成。2.第7天血管侵入骨骺,次级骨化中心开始形成。随着日龄增大次级骨化中心不断扩大,第13天骨骺生长区大量血管侵入,软骨外基质大面积钙化,第19天血管侵入减少,但骨骺仍未完全钙化。3.伴随软骨细胞的增殖分化,Ⅱ型胶原主要在增殖和肥大软骨细胞上表达。LYVE-1肥大软骨细胞与成骨区表达。Ⅱ型胶原随着日龄增大,表达量呈现升高趋势,第15天后开始下降。LYVE-1mRNA在第5天与13天表达呈上升趋势。VEGF-CmRNA表达与LYVE-1mRNA表达呈正相关,整体趋势基本保持一致。研究结论:1.股骨骨化表现为软骨内成骨,初级骨化中心与次级骨化中心软骨发育有差异,次级骨化中心无软骨细胞肥大期。2.股骨内骨化过程中有毛细淋巴管存在,且主要存在于软骨细胞肥大区与成骨区。3.血管生长因子VEGF-CmRNA变化趋势与LYVE-1mRNA呈正相关,与淋巴管生长变化一致。
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