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背景动脉粥样硬化斑块破裂,形成溃疡、继发管腔内血栓形成,是突发性心脑血管疾病的主要病理基础。近年的研究显示,炎症反应是导致斑块不稳定的主要因素,他汀类药物具有一定的抗炎作用。如何控制炎症反应而改善不稳定斑块的脂核大而纤维帽薄等形态特点,使之趋于稳定,已经成为防治动脉粥样硬化(AS)的主要目标。鉴于AS炎症反应与中医毒邪致病特点的相似之处,本课题在既往的中医痰瘀病机基础上,提出从毒论治理念,采用解毒活血作用的四妙勇安汤干预AS病变。研究目的研究四妙勇安汤对ApoE基因敲除(ApoE-/-)模型小鼠主动脉斑块稳定性的影响及其相关机制。即观察四妙勇安汤对ApoE-/-小鼠主动脉粥样斑块病理形态稳定性的影响,进而主要从炎症角度探讨其作用机制,旨在为临床治疗AS提供理论依据。研究方法方法：ApoE-/-小鼠高脂饲料(“西方膳食”饲料)喂养方法制备AS模型。45只ApoE-/-基础饲料饲养至7～8周龄,改喂高脂饲料13周。随机处死5只小鼠,主动脉根部组织HE染色,确认基础AS病变形成。其余40只小鼠随机分为4组：模型组10只、辛伐他汀组10只、四妙勇安汤组(小剂量)10只、四妙勇安汤组(大剂量)组10只。并以同品系C57BL/6J小鼠10只作为正常对照。各药物组给予相应药物灌胃,模型组和正常组生理盐水灌胃。32周末摘眼球采血,处死动物,开胸取出心脏和主动脉,予以固定。参照Suzuki等确立的方法,每只小鼠的主动脉根部留取4个相同界面切片,相邻切片分别行HE染色、Movat染色、苦味酸-天狼星红染色以及免疫组织化学染色。镜下观察以下内容：1.主动脉根部斑块形态结构及其内部成分,重点观察斑块内脂质核大小、纤维帽情况(纤维帽厚度及其连续性、胶原含量),并结合免疫组化观测斑块内平滑肌细胞和巨噬细胞表达量。IPP6.0图像分析软件测量斑块面积、斑块内细胞外脂质、胶原成分含量、平滑肌细胞和巨噬细胞的表达面积与各自占斑块面积的百分比等指标,对病理形态变化予以半定量分析。2.全自动生化仪检测血脂含量。3.检测炎症相关指标：酶联夹心法测血清白介素-1β(IL-1β)水平；免疫组化方法测主动脉根部斑块内CD68、IL-1β、核转录因子-κB(NF-κB)、过氧化物酶体增殖物激活受体,(PPAR-γ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达量。结果1.ApoE基因缺陷小鼠高脂饲料喂养32周,在主动脉根部可形成不稳定特征的斑块：斑块脂核大且纤维帽薄、炎症细胞浸润。2.与模型组比较,四妙勇安汤(大剂)组的斑块厚度增加,病理形态以纤维斑块为主,斑块内TGF-β1显著升高(P<0.05),而VEGF表达显示降低趋势(P>0.05)。3.与模型组比较,四妙勇安汤(大剂)的TC水平均升高。其升高血脂作用有待进一步验证。4.与模型组比较,四妙勇安汤(大剂)斑块内NF-κB p65表达显著增加(P<0.05),且斑块内CD68和IL-1β表达均有增加趋势(P>0.05)；而四妙勇安汤(小剂)斑块内IL-1β表达显著降低(P<0.05),而且斑块内CD68和NF-κB p65表达也显示降低趋势(P>0.05)。5.与模型组比较,四妙勇安汤(小剂)组斑块内脂核面积减小、胶原含量显著增多(P<0.05),效果优于四妙勇安汤组(大剂)和对照组。结论1.ApoE基因缺陷小鼠高脂饲料喂养32周,主动脉根部可形成AS不稳定斑块。2.解毒活血剂四妙勇安汤具有一定的稳定斑块效应,因剂量不同而效应各异。小剂量四妙勇安汤减少脂核面积、增加胶原含量；而大剂量四妙勇安汤则以形成纤维斑块为主。其可能机制在于,小剂量四妙勇安汤的控制炎症效应优于大剂量四妙勇安汤。同时提示药物剂量与病情程度相符合,才能发挥更好的疗效。四妙勇安汤大小剂量之间的疗效差异,有待深入研究。3.治疗热毒型脱疽的四妙勇安汤,也可运用于内科动脉粥样硬化症的治疗。鉴于AS病变的复杂性、人体与小鼠的差异性,临床长期应用时适当监测为宜。