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核糖体失活蛋白(ribosome inactivatingproteins,RIPs)是一种广泛存在于高等植物体内的防御性毒蛋白,通过RNAN-糖苷酶活性专一地水解核糖体第A4234位上的核糖与腺嘌呤碱基之间的糖苷键,进而破坏核糖体结构从而达到抑制蛋白质合成的目的。RIPs具有广泛的多态性及多种生物学功能,目前在抗癌症、抗病毒等医学领域的研究应用尤为受到重视,同时RIPs抗植物病虫害的特性也广见报道。本研究以三角梅为材料,根据文献报道的分布于地中海区域的三角梅(Bougainvillea spectablis Willd)RIPs基因cDNA序列设计引物,以厦门本地光叶艳紫三角梅(B.glabraChoisy)cDNA为模板,经RT-PCR扩增得到10条三角梅RIPs同源目的基因片段并分别编号命名,其中一条Bou-J与本实验室前期已经扩增得到的目的片段在编码区基因序列完全相同,另一条Bou-K与文献中已经报道的红花三角梅(BB.spectabilis Willd)核糖体失活蛋白基因序列完全相同。选取Bou-J和Bou-K这两条目的片段,通过构建表达载体,利用农杆菌介导的植物转基因技术分别将目的基因片段Bou-J和Bou-K导入番茄植株,得到了 18株Bou-J和6株Bou-Kd阳性转基因番茄植株,对转基因番茄植株的抗病虫害特性进行了初步研究,结果如下:Bou-J及Bou-K转基因番茄植株均对蚜虫表现出了显著的抗性,并且Bou-J组抗性强于Bou-K组;Bou-J及Bou-K转基因植株同样表现出了对于灰霉菌的抗性,两组植株的抗性基本一致;Bou-K转基因植株对于烟草花叶病毒表现出一定的抗性,而Bou-J植株组则没有表现出明显的抗性。本研究表明:通过对转基因再生番茄植株的抗性鉴定证实了三角梅RIPs确实具有抗病虫特性,可以应用于植物的转基因抗病虫育种。同时三角梅RIPs具有多抗性,为三角梅RIPs在植物抗病虫基因资源以及培育多抗性植物新品种方面提供了理论基础与指导。本研究得到了多条RIPs同源基因片段,这与本实验室前期对三角梅RIPs基因存在多态性的研究相符合。同时Bou-J和Bou-K转基因番茄的抗病虫特性存在差异,这说明三角梅RIPs功能上也存在多态性。因此,我们在利用三角梅RIPs进行植物的转基因抗病虫育种时要对目的基因进行筛选,得到抗性强且抗菌、抗虫谱广的转基因植株。