中药穿山龙及麦冬的化学成分研究

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中药穿山龙与麦冬含有大量甾体皂苷类成分。甾体皂苷是一类重要的中药活性成分,具有多种生物活性,如心脑血管活性、抗痴呆、抗肿瘤、抗菌、消炎、杀精和抗生育等,具有良好的药用价值和开发潜力,有必要对这两种中药的化学成分进行系统研究。本论文共分四章。第一章文献综述分别对穿山龙和麦冬的植物资源、成分、药理活性进行了系统地阐述。其中详尽列出了穿山龙迄今为止分离鉴定的56个化合物,麦冬的174个化合物。阐述了2种中药的多种生物活性。共引用89篇参考文献。第二章穿山龙化学成分及其活性研究以30%、55%、85%乙醇洗脱,将穿山龙的70%乙醇提取物用Sp825大孔吸附树脂柱色谱粗分为三部分。其中55%部分主要使用反相C18柱色谱共分离得到28个化合物,用高分辨质谱、核磁共振等波谱并结合酸水解、衍生化等化学手段共鉴定出其中25个化合物的结构(23个为呋甾皂苷),其中有15个为新化合物:穿龙薯蓣皂苷A-O (Diosnipponicoside A-O,1-15);另有5个首次从薯蓣属中分离得到的已知化合物(25R-龙血树皂苷O,16;25R-龙血树皂苷P,17;anguiviosides XV,19;3-0-[a-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)]-fβ-D-吡喃葡萄糖基26-O-β-D-吡喃葡萄糖基胆甾-5-烯-16,22-二酮,20;kushenol O,24),2个首次从该种中(粉背薯蓣皂苷G,18;(25R)-26-O-βD-吡喃葡萄糖基-呋甾-△5(6)-烯-3β,22a,26-三羟基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷,23)分离得到的己知化合物。在总结了甾体皂苷的色谱行为与质谱裂解规律后,基于UPLC-Q-TOF MSE技术对穿山龙中呋甾皂苷类成分进行了在线快速鉴定,指认了18个制备得到的化合物及鉴定了38个未得到的化合物结构,其中有20个为可能的新化合物,6对为同分异构体。对12个新的甾体皂苷用MTT法进行了抗肿瘤的活性筛选,3种癌细胞(人肺癌细胞、人肝癌细胞、人盲肠癌细胞)的抑制率均在20%以下,表明这些甾体皂苷抗肿瘤活性不明显。第三章麦冬化学成分研究从麦冬的95%乙醇提取物中,用各种色谱(正相硅胶柱色谱、反相C18柱色谱、MCI Gel柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱),波谱(高分辨质谱、核磁共振)、化学(酸水解并衍生化)等方法,共分离鉴定了25个单体化合物,包括6个甾体皂苷、7个苯丙醇苷、3个高异黄酮、3个龙脑苷、2个酚苷、2个生物碱、1个胆甾醇苷及1个桉叶醇苷。其中包括3个新化合物:3,4-二羟基-丙烯基苯-3-O-ββ-D-吡喃葡萄糖基-4-O-β-D-呋喃芹菜糖基-(1→6)-βD-吡喃葡萄糖苷(26)、3,4,5-三羟基-烯丙基苯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-4-O-fβ-D-吡喃葡萄糖苷(27)、桉叶醇11-O fβ-D-吡喃木糖基(1→6)-△-D-吡喃葡萄糖苷(49);22个已知化合物,其中9个为首次从沿阶草属中分离得到:3,4-二羟基-丙烯基苯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,(28);3,4-二羟基-丙烯基苯-4-O-βD-呋喃芹菜糖基-(1→6)-β-D吡喃葡萄糖苷,(29);4-羟基-丙烯基苯-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,(30);咖啡酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,(31);龙脑7-O ββ-D-呋喃芹菜糖基(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷,(43a);对-羟基-苯乙基-葡萄糖苷,(44);苔黑酚葡萄糖苷,(45);1,2,3,4-四氢-咔啉-3-羧酸,(46);L-苦杏仁苷,(47)。第四章总结与讨论穿山龙与麦冬作为常见中药,本研究利用多种手段对其化学成分进行系统研究,得到了多个新化合物并对其进行了初步活性研究,对未知甾体皂苷类成分进行了液质分析。本文的创新性在于:对穿山龙大极性部位进行系统分离并得到一系列新的呋甾皂苷,并利用UPLC-MS对穿山龙的未知成分进行在线快速鉴定。在麦冬方面,从95%乙醇提取物中分离得到一系列的苯丙素类化合物,其中有2个新化合物和4个属内首次分离得到的已知化合物。展望了后续可继续开展的工作:穿山龙还有可继续分离鉴定的部位,包括总呋甾部位剩余部分和总螺甾部位,及相关活性;麦冬中的苯丙素类化合物有必要对其进行系统性研究。
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