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目的
了解缺血预刺激对大鼠视网膜经典型蛋白激酶C(cPKC)亚型特异性蛋白表达及膜转位水平的影响，及其与缺血再灌注损伤后视网膜神经元凋亡的关系，探讨缺血预适应对大鼠视网膜神经元缺血再灌注损伤的保护机制。
材料与方法
(1)建立大鼠视网膜缺血预刺激模型及视网膜缺血再灌注损伤模型，用HE染色法观察造模适宜参数；
(2)用蛋白免疫印迹技术(Western blot)观察缺血预刺激后不同时间，视网膜cPKC亚型特异性蛋白表达及膜转位水平；用免疫组织化学方法观察处理前、后cPKC亚型特异性蛋白在视网膜的分布及表达情况；
(3)向大鼠玻璃体腔注射cPKC特异性抑制剂，用TUNEL染色法观察缺血预刺激后，缺血再灌注损伤视网膜神经细胞凋亡情况。
结果
(1)采用升高前房灌注压至130mmHg，维持5分钟的方法，可以使大鼠视网膜产生有效缺血，7天后观察未发现组织结构异常改变。升高前房灌注压至130mmHg，维持60分钟，使大鼠视网膜产生典型缺血再灌注损伤病理改变，主要导致内层视网膜变薄及内核层、神经节细胞层细胞丢失(p<0.05)。
(2)缺血预刺激后12～168小时，cPKCa表达水平升高，72小时达高峰，其膜转位水平未发生改变(p<0.05)；cPKCγ表达水平在12小时开始升高，24小时达高峰，168小时恢复正常(p<0.05)，其膜转位水平在20～60分钟升高，24小时恢复正常(p<0.05)；cPKCβⅠ、βⅡ蛋白表达及膜转位水平均未发生改变。cPKCα主要分布于内、外核层；βⅠ、βⅡ主要分布于内核层，少量分布于外核层，偶见于神经节细胞层；cPKCγ表达量极低，仅见于少数内核层细胞及神经节细胞。
(3)IP使缺血再灌注损伤后视网膜神经节细胞层和内核层凋亡细胞数量减少(p<0.05)，玻璃体腔注射cPKCs特异性阻断剂部分消除缺血预适应的保护作用(p<0.05)。
结论
(1)短期升高前房灌注压可以对缺血再灌注损伤后视网膜组织结构产生保护。
(2)IPC使神经视网膜组织中cPKCα、γ表达水平和cPKCγ膜转位水平上调，并通过抑制细胞凋亡过程，对视网膜缺血再灌注损伤产生保护作用。