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心房颤动(AF)是临床上最常见的一种持续性心律失常,其发病率随年龄而增加。综合结果显示,90%以上的PAF起源于肺静脉肌袖,作为诱发房颤的重要机制之一,静脉肌袖自律性增高在启动和维持PAF中也发挥着不可替代的作用。本实验我们首先选择健康的老龄犬(7-9岁)进行快速起搏刺激,10周后进行房颤诱发刺激,获得老龄犬房颤模型,老龄犬经快速起搏后房颤发生率明显高于非起搏组和成年对照组,而应用起搏通道特异阻滞剂后房颤发生率降低。快速起搏肺静脉肌袖细胞中约82.6%呈现出自发性除极;未经起搏处理肌袖细胞约仅有60%的细胞出现自律性。未经起搏处理的老龄犬肺静脉肌袖细胞上记录到I_f电流幅值较小,且激活较慢。而经快速起搏的老龄犬肺静脉肌袖细胞上I_f电流明显增大,与未经处理组相比有显著性差异(P＜0.01,n=15)。应用β受体激动剂isoproterenol(ISO)可增加I_f电流密度,使动作电位趋于类似窦房结样有自律性特征。而起搏电流特异抑制剂Ivabradine(Iva)可以减少老龄房颤犬肺静脉肌袖细胞I_f电流,动作电位特征更像工作细胞的特征,从而房颤发生率也减低。为了进一步探讨I_f电流的发生机制,应用RT-PCR,Western Bloting、瞬时转染的通道蛋白异源性表达技术和膜片钳技术确定了HCN4亚型是老龄犬肺静脉肌袖细胞膜上起搏通道主要的存在形式。明确了HCN2和HCN4对老龄犬肺静脉肌袖细胞I_f电流的构成比,确定导致I_f电流改变的主要亚型,从一个侧面解释了老年房颤发生的分子和离子机制,对于深入揭示老年PAF的启动和今后特异性药物的研发将有重要意义。