【摘 要】
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转录因子DREBP(结合DRE元件)和EREBP(结合GCC元件)亚族属于上述的EREBP族,它们均含高度保守的DNA结合区,即AP2/EREBP结构域.它们的AP2/EREBP结构域中有且仅有第14、19位两个
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转录因子DREBP(结合DRE元件)和EREBP(结合GCC元件)亚族属于上述的EREBP族,它们均含高度保守的DNA结合区,即AP2/EREBP结构域.它们的AP2/EREBP结构域中有且仅有第14、19位两个氨基酸残基在每个亚族中绝对保守,但在亚族间不同.为此把DREB1A(属于DREBP亚族)的14、19位氨基酸残基单独或一起突变为EREBP亚族的对应残基,用酵母单杂交方法研究了这两个绝对保守的氨基酸残基对AP2/EREBP族转录因子功能的影响.为了确定决定DREBP和EREBP两个亚族蛋白功能差异的分子机理,我们比较了DREBP和EREBP两个亚族蛋白的AP2/EREBP结构域中氨基酸残基的同源性,结果发现有五个氨基酸残基(第9、14、19、26和32位残基)在每一亚族中保守,但在亚族间不同.我们猜测DREBP和EREBP两个亚族间功能的特异性可能由这五个氨基酸残基中的某些残基决定.根据上述假说,通过比较AP2/EREBP结构域的氨基酸序列同源性,我们判断TINY和TSH1应分别为DREBP和EREBP亚族的转录因子.运用酵母单杂交方法,我们证实TINY和TSH1的功能与推测的一致.从而确定了两个AP2/EREBP族蛋白的功能.因为我们没有直接证据判断我们的假说是否正确,因此不能排除上述结果是偶然的巧合.目前我们正在检验这一假说.三氟乙醇可显著激活牛小肠碱性磷酸酶(CIAP).激活是一个时间依赖的过程,可分为三相.0-60﹪三氟乙醇不明显改变碱性磷酸酶的荧光最大发射峰位,但明显改变酶的二级结构,特别是增加酶的α-螺旋含量.因此三氟乙醇激活牛小肠碱性磷酸酶是由于其改变了酶的构象(特别是二级结构),从而使酶的活性中心构象更有利于酶促反应的进行.
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