电针干预对TBI大鼠脑组织水肿调控的研究

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目的:通过观察不同时间点电针介入对大鼠创伤性脑损伤(TBI)后脑水肿和患侧肢体回缩力的影响.研究其调节机制,探索电针治疗TBI的合理时间窗。方法:将170只经过适应性喂养的SD大鼠,随机编号分为空白对照组(10只)、假手术组(10只)、模型组(60只)、电针1组(60只)和电针2组(30只)。利用电子颅脑损伤仪(e CCI)制备创伤性脑损伤模型(空白组和假手术组除外),电针1组于造模后4h开始治疗,电针2组于造模后第8d开始治疗。穴位选用合谷、曲池、百会、关元、涌泉和足三里。合谷和曲池为一组,涌泉和足三里为一组,这两组交替使用电针。(1)造模后7d、14d和21d测试并评价大鼠患侧前后肢肢体回缩力。(2)造模后24h、72h、7d、10d和14d取大鼠患侧脑组织进行病理切片染色(HE染色),在光镜下观察脑组织病理形态的变化。(3)造模后24h、72h、7d、10d和14d取大鼠脑组织,利用Western Blot实验方法检测脑组织中AQP-4的动态变化。结果:造模后7d、14d和21d三个时间点分别测试各组大鼠患侧前后肢肢体回缩力。结果显示,电针1组前后肢肢体回缩力比电针2组、模型组的好(P<0.01),比空白组和假手术组稍差。光镜下观察HE染色切片。空白组和假手术组脑组织中神经元细胞分布十分均匀,能清晰地观察到神经元细胞的大体形态,细胞结构完整,无细胞坏死、凋亡。模型组损伤区域中心有明显液化坏死的空白区域,空白区域周围有炎性细胞的聚集,周围细胞分布不均匀,细胞核深染,有核固缩和变形,并且随着时间的延长坏死灶范围扩大。电针组坏死灶的面积显著缩小,且炎性细胞浸润量减少,水肿面积变小。电针1组的效果比电针2组要好。Western Blot结果显示,AQP-4含量在空白对照组和假手术组之间没有区别,是正常含量;模型组AQP-4含量在24h接近空白组和假手术组,在72h显著降低,7d后开始逐步恢复,10d和14d的含量基本保持一致,但含量超过空白对照组和假手术组;电针1组在24h,AQP-4含量就开始增加,且高于空白组和假手术组,在72h达到高峰,7d和14d保持稳定水平;电针2组AQP-4含量在10d和14d的恢复接近于模型组10d和14d的恢复水平,比空白组和假手术组略高,且比电针治疗1组10d和14d的含量少。结论:电针对创伤性脑损伤的介入治疗应越早越好,更有利于发挥电针疗法对TBI后脑的保护作用。作用机制可能是,在血管源性的脑水肿电针治疗通过提高脑组织中AQP-4的表达来抑制脑水肿,从而减少神经元的损伤,改善预后。
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