菝葜的甾体皂苷成分及其抗肿瘤活性研究

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菝葜(Smilax chinaL.)系百合科(Liliaceae)菝葜属植物,主要分布于我国长江以南地区,其干燥根茎入药,具有祛风利湿,解毒消痈之功效。根据文献报道,菝葜根茎中含有甾体皂苷、黄酮、苯丙素、黄芪类和有机酸等多种化学成分,其中甾体皂苷是菝葜中主要的化学活性成分之一。甾体皂苷是天然产物中一类重要的活性物质,具有广泛的药理活性,如抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化、抗尿酸、利尿、抗血栓等,具有很高的药用价值和开发潜力。但到目前为止对菝葜中甾体皂苷成分的研究相对较少。为寻找有活性的甾体皂苷类成分,本课题选取产地为湖北的菝葜作为研究对象,对其甾体皂苷成分展开系统的研究,并对分离得到的部分单体甾体皂苷进行了初步的抗肿瘤活性筛选。首先,对菝葜属中甾体皂苷的提取分离、结构解析、化学成分及其药理活性的研究进展进行了综述。其次,从菝葜块状根茎的95%甲醇提取物中,通过各种色谱手段(硅胶柱、聚酰胺、MCI CHP20P、Sephadex LH-20,Toyopearl HW40F 和 ODS 等柱层析)分离得到10个甾体皂苷化合物,并通过理化性质以及MS、1D NMR(1H NMR、13C NMR)和 2DNMR(HSQC、HMBC、1H-1H COSY、NOESY)等波谱分析手段,鉴定了 10个化合物的结构为呋甾烷型甾体皂苷,分别为:(25R)26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3β,20α,26-三羟基-呋甾烷-5,22-二烯-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3β,23,26-三羟基-25(R)-呋甾烷-5,20(22)-二烯-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、三脉菝葜皂苷A(trinervulosidesA)(3)、甲基原薯蓣皂苷(methylprotodioscin)(4)、25(S)26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-甲氧基-3β,26-二羟基-5-烯-呋甾烷-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、25(R)26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-甲氧基-3β,26-二羟基-5-烯-呋甾烷-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、dioscoreside E(7)、dioscoresides C(8)、26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3β,26-二羟基-20,22-断-25(R)-呋甾烷-5-烯-22-酮-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)和26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3β,26-二羟基-22-过氧羟基-25(R)-呋甾烷-5-烯-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)。以上化合物中1,4已从植物菝葜中分离得到,3为首次在该植物中发现,2,5,6,7和8为首次从菝葜属植物中分离得到,9,10为未报道的新化合物。化合物10是苷元含有过氧羟基(-OOH)的呋甾烷型甾体皂苷,此结构在甾体皂苷结构中极具特点和新颖性。最后,通过四唑盐比色试验(MTT)检测化合物1-9对人肺腺癌细胞株HCC-78和人非小细胞肺癌细胞株H3122增殖的影响。结果表明:化合物7对HCC-78细胞有较弱抑制作用,而对H3122细胞有中等抑制作用;化合物4、5、6和8对两种肺癌细胞显示很好的抑制作用,其中化合物4、5和6的抑制作用最强,化合物4、5和6对人肺腺癌细胞株HCC-78的IC50值分别为0.73、0.92和0.035μM,化合物4、5和6对人非小细胞肺癌细胞株H3122的IC50值分别为1.4、0.74和1.51μM。因此,化合物4、5和6具有良好的抗肿瘤活性,可作为抗肿瘤先导化合物的候选物。
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