纳米适配体传感器检测甲胎蛋白研究

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甲胎蛋白(AFP)是由胚胎卵黄囊产生并从肝脏中分泌出的血浆蛋白,人血清中AFP的含量与肝癌细胞密切相关,临床上将AFP看作肝癌的重要肿瘤标志物。因此,寻找能够快速、准确检测AFP含量的分析方法对肝癌的早期诊断和长期治疗具有重要意义。在本文中,以AFP为研究对象,构建了两种类型的纳米适配体传感器,用于血清中AFP的检测。主要研究内容如下:(1)基于光寻址电位传感器(LAPS)检测AFP的纳米适配体传感器研究。搭建了包含LAPS基片、光源驱动电路、信号放大电路和Labview采集平台的LAPS检测系统。采用层层自组装技术,利用AFP适配体构建了LAPS生物敏感膜,结合LAPS系统,搭建基于LAPS的纳米适配体传感器用于AFP的检测。通过X射线光电子能谱仪(XPS)和扫描电镜(SEM)表征了不同修饰阶段LAPS芯片表面的元素含量和形态。采用单因素法对实验条件进行优化。在最优条件下,基于LAPS的纳米适配体传感器的电压偏移量与AFP浓度(0.1-100μg/m L)有良好的线性关系,线性回归方程为Y(mV)=2.5892X(μg/mL)+103.42778(Y为电压偏移量,X为AFP浓度),相关系数为0.9959,灵敏度为2.5892 mV/μg/m L。该传感器抗干扰能力强、灵敏度高。(2)基于TH/RGO/Au NPs检测AFP的纳米适配体传感器研究。通过电沉积、静电吸附、分子间作用力等层层自组装技术构建生物敏感膜,使用AFP适配体作为识别分子,硫堇/还原氧化石墨烯/纳米金(TH/RGO/Au NPs)作为传感平台,构建用于AFP检测的纳米适配体电化学传感器。利用纳米金和石墨烯良好的催化性能和较大的比表面积将硫堇固定在电极表面,利用硫堇作桥接分子和指示剂来捕获AFP适配体并产生不同的检测信号,通过差分脉冲伏安法(DPV)实现对AFP的定量检测。在最优实验条件下,得到电流与AFP浓度的关系曲线,线性回归方程为Y(μA)=0.3471X(μg/m L)+47.984(Y为峰值电流,X为AFP的浓度),其线性范围为0.1-100μg/m L,相关系数为0.9987,检测限为0.050μg/mL。该适配体传感器对AFP具有良好的特异性和稳定性。用于实际血清样本检测时,回收率在101.52%至107.95%之间。
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