产金属硫蛋白酵母菌原生质体电融合及酵母Cu-MT拮抗Y射线诱发DNA链断裂的研究

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1.采用原生质体电融合技术,由不能水解淀粉、细胞生物最低、只抗Cu<2+>、钨硫蛋白(MT)中cys含量高的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae,a)单倍体BD101-25和具淀粉水解能力、细胞生物量高、Cu<2+>、Cd<2+>、抗生高、金属硫蛋白cys含量低的异常毕赤酵母(Pichia amomala,a)单倍体BD102-13获得4个融合株.融合组合有两亲株细胞之和,并具有水解淀粉能力,Cu<2+>、Cd<2+>抗生高,细胞生物最高,MT中cys含量高等特点.属间融合株Cu<2+>、Cd<2+>抗性的遗传性状稳定;2.以g12细胞为材料,检测酵母Cu-MT具有拮抗γ射线诱发的核DNA链断裂作用.IGyγ射线照射前,细胞分别用10、50μg/ml酵母Cu-MT处理.细胞悬液与低熔点琼脂混匀制备三层凝胶板,进行单细胞凝胶电泳(SCGE).观察DNA链断裂形成的彗星影像.核DNA迁移距离和拖尾细胞频率变化情况表明Cu-MT显著抑制DNA损伤,抑制程度表现出剂量相关性.50μg/ml高剂量Cu-MT可能抑制自发产生的DNA链断裂.
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