葛根芩连汤在大肠杆菌致泻小型猪体内药代动力学及药效动力学研究

• 作 者: 凌霄
• 出 处: 南方医科大学
• 发表日期: 2017年01期
• 关键词: 葛根芩连汤 大肠杆菌致泻小型猪 药代动力学 药效动力学 肠道粪菌代谢

目的:通过药代动力学(PK)实验,研究肠道感染性腹泻对葛根芩连汤(GQD)主要功效成分体内过程的影响:通过药效动力学实验(PD)研究主要药理指标的变化过程;对PD和PK进行相关性拟合,进一步明确GQD物质基础及其体内过程;对比健康和大肠杆菌致泻小型猪粪菌对GQD功效成分代谢差异,进一步阐述感染性腹泻对GQD的影响。通过以上研究更好地了解GQD解表清里功效的科学内涵。方法:(1)10-15日龄西藏小型猪,口服致病性大肠杆菌(E-coli),建立腹泻模型,进行不同剂量GQD药效学实验并确定最佳给药剂量。(2)采用最佳给药剂量,进行血清TNF-α,IL-6,血液白细胞计数(WBC)和粪便大肠杆菌计数的PD实验,绘制单次给药后各指标的效-时曲线。(3)建立小型猪血浆中葛根素、大豆苷、大豆苷元、黄芩苷、汉黄芩素、小檗碱、巴马汀、药根碱的UHPLC-MS/MS定量测定方法,分别在生理及模型小型猪体内进行PK研究,计算PK参数并进行统计分析。(4)对PD数据和PK数据进行相关性分析,判断各药效指标与各成分间的关联。(5)建立小型猪肠道菌群悬液中葛根素、大豆苷、大豆苷元、黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素、小檗碱、巴马汀、药根碱的UHPLC-MS/MS定量测定方法,对病理和生理粪便菌群悬液中GQD代谢差异进行研究。结果:(1)GQD低剂量组抗炎、抑菌、止泻作用多方面均优于高、中剂量组,选用低剂量组为后续实验剂量。(2)单次给药后,血清IL-6、TNF-α,血液WBC和粪便E-coli计数较模型组显著下降,各指标随着给药时间的推移均出现先下降后上升的趋势。(3)病理组葛根素和汉黄芩素的AUC0-t,Cmax,大豆苷、大豆苷元和黄芩苷的Cmax均显著高于生理组。(4)PD和PK相关性分析结果显示,与血清TNF-α,血液WBC呈极强负相关为黄芩苷和葛根素,呈强负相关的为汉黄芩素,药根碱。各成分仅有小檗碱和粪便E-coli计数有较强负相关。(5)在肠道菌群代谢实验中,病理组和生理组GQD中的黄芩苷、汉黄芩苷、大豆苷分别被大量代谢为黄芩素、汉黄芩素和大豆苷元。病理组代谢产物和生理组相同,但代谢速率是生理组的2倍。结论:小型猪E-coli腹泻可促进葛根中葛根素和黄芩中的汉黄芩素的吸收,增加大豆苷、大豆苷元和黄芩苷的血药浓度峰值,有利于这些功效成分发挥药理作用,对疾病产生积极影响。病理组肠道菌群加速对GQD各成分的代谢可能是造成病理和生理吸收差异的原因之一。GQD主要是通过吸收入血的葛根素和黄芩苷和汉黄芩素等抑制炎症反应,各入血成分和抗菌作用关联不大。推测,是GQD中未吸收入血成分在肠道发挥局部作用,抑制E-coli增殖,发挥治疗作用。