欧洲越橘果渣酵素的制备及在面膜中的应用

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欧洲越橘营养丰富,被国际粮农组织列为五大保健食品之一,具有丰富的花青素、多酚类物质、类黄酮物质和维生素等活性物质,对人体心血管疾病和炎症具有良好的预防和抑制作用。欧洲越橘不论食用还是药用,都具有相当高的经济价值。但由于欧洲越橘生长条件严苛、产量稀少、储运困难等原因,导致其价格十分昂贵。欧洲越橘的花青素含量十分丰富,所以经常被用作提取花青素,而在对欧洲越橘进行花青素提取后通常会产生大量欧洲越橘果渣,这些果渣常被当做废弃物遗弃,不仅造成资源浪费,而且污染环境。欧洲越橘果渣之中仍然残留着许多营养物质,例如花色苷、维生素E等,如果能将其充分利用,不仅充分利用了欧洲越橘这一珍贵的资源,而且减轻了环境压力,响应了当下绿色可持续发展的时代背景。本论文以欧洲越橘花青素提取线上的副产物越橘果渣为主要原料,制得生物酵素,并以生物酵素为主要原料制备成高附加值活性面膜。为此,首先对欧洲越橘果渣进行酶解和发酵工艺优化,对发酵后的酵素进行检测分析,并以此酵素为主要原料添加到面膜之中,最后对面膜进行综合评测。主要工作内容和结论如下:(1)为了对欧洲越橘果渣进行充分发酵,在发酵前利用纤维素酶和果胶酶对果渣进行酶解。以酶解率为指标,通过单因素试验确定最适酶解温度、最适酶解时间、最适酶添加量、最适pH。根据单因素试验结果设计进行正交试验,并利用方差分析、极差分析、LSD法等方式分析试验结果。正交试验优化后最终确定的复合酶酶解工艺为:酶解温度为50℃、酶解时间为210min、复合酶添加量为1.0%、pH为5.0,在此条件下,能够较好的对果渣进行酶解,酶解率为42.05±2.89%。(2)在对果渣进行酶解处理后,添加少量越橘鲜果和柠檬,混合后制备成发酵底物,以植物乳杆菌为发酵菌进行发酵。并以超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)酶活力为指标,进行单因素试验确定植物乳杆菌的最佳发酵温度、发酵时间和接种量。根据单因素试验结果,设计响应面试验优化发酵工艺。在确定植物乳杆菌的最优发酵工艺后,首先在发酵底物中,接入0.2%活化后的酵母菌,在28℃条件下发酵1d,然后接入3.8%的植物乳杆菌,在39℃的条件下发酵3d。发酵结束后进行过滤,所得滤液即为欧洲越橘酵素,并对酵素中的原花青素、总黄酮、总多酚和总糖含量进行检测。结果表明:植物乳杆菌的最适发酵时间为3d、发酵温度39℃、发酵菌接种量3.8%,在此条件下SOD酶活力可达到78.017 u/mL。对酵素中的成分进行检测,酵素中总多酚的含量为0.48 mg/mL,总黄酮的含量为0.52 mg/mL,原花青素的含量为0.14 mg/mL,总糖含量为2.29%。(3)对酵素的酪氨酸抑制率进行测试,然后向酵素中添加褐藻提取物等物质制备成面膜液,将面膜液添加到面膜纸上,封口杀菌后制备成面膜成品。对成品面膜进行感官指标和理化指标评测,包括面膜的外观性状、pH值、耐热性测试、耐寒性测试等。并通过体外模拟人体皮肤,对面膜的保湿性能进行了测试。选取50名受试人员对面膜进行感官评价和皮肤测试,评分指标包括面膜的气味、粘度、色泽、舒适度体验,并最终给予总分。同时,通过皮肤测定仪,在受试人使用面膜前后,对皮肤状态进行测定。评测结果表明:越橘酵素对酪氨酸酶的抑制率为8.2%。面膜产品呈白色,质地柔软,表面稍粘稠,有淡淡芳香气味,pH为4.82。具有较好的耐热性和耐寒性。在进行25min保湿性试验后,面膜保湿率为75.1%。受试人员对面膜评价总分为8.9分,对应等级为很好,各指标的评分中,面膜的颜色得分最高,面膜的气味得分相对最低。在皮肤测试中,使用面膜后受试者皮肤的弹力系数和水分系数有明显的提高,皮肤油分系数明显下降。
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