四川人工牧草主推区牧草病害及饲用玉米大斑病和褐斑病致病机理研究

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牧草病害是造成畜牧业发展缓慢的主要原因之一,牧草病害直接导致牧草品质下降,产量降低,引起巨大的经济损失。目前,草地病害中最主要的是真菌病害,前人的研究主要集中在甘肃、内蒙等少数人工牧草方面上,如苜蓿、沙打旺等。而对四川人工草地真菌病害的调查及研究很有限。因此,本文对四川以成都平原为中心,辐射川东、川西、川南、川北四个区域牧草真菌病害进行了比较系统的调查研究,并且对饲用玉米大斑病和褐斑病病原菌毒素粗提液的致病机理进行研究。20162018年,对四川人工牧草主推区的牧草进行病害调查,并采集病株,进行了症状观察和病原菌鉴定。采用常规的分离鉴定方法对各种病害进行真菌分离培养鉴定,根据病原菌孢子的形态、结合寄主植物的种类和病害症状鉴定出锈病7种,黑粉病1种,白粉病4种,霜霉病2种,大斑病2种,小斑病1种,叶枯病5种,纹枯病2种,褐斑病2种,黄斑病1种,黑茎病1种,黄萎病1种,根腐病2种,黑斑病1种,紫斑病1种,叶斑病3种,红条病1种,香柱病1种,黑腐病1种,霉污病1种,菌核病1种,软腐病1种,赤斑病1种,以及病毒病3种。涉及草地植物4个科。本文对饲用玉米大斑病和褐斑病菌毒素粗提液的生物活性、蛋白质和可溶性糖含量、致病性及其对饲用玉米胚根防御酶活性的变化进行了初步研究。试验结果如下:(1)饲用玉米大斑病和褐斑病菌毒素粗提液的生物活性测定和组分分析表明,毒素粗提液对饲用玉米种子萌发和胚根伸长有抑制作用;并且其对对饲用玉米种子萌发和胚根伸长的抑制作用随着毒素粗提液浓度的升高而加重。用考马斯亮蓝法和蒽酮比色法测得用玉米大斑病和褐斑病菌毒素粗提液的蛋白质含量分别为892.283μg·m L-1和233.587μg·m L-1,可溶性糖含量分别为333.333μg·m L-1和297.778μg·m L-1。(2)饲用玉米大斑病和褐斑病菌毒素粗提液的致病性测定表明,用饲用玉米大斑病、褐斑病菌毒素粗提液处理时间的长短对饲用玉米胚根相对电导率的影响显著。在相同毒素粗提液浓度条件下,随处理时间的延长,处理组电导率呈先降低后升高,而对照组中有一个小幅上升。在同一处理时间条件下,与对照相比,不同浓度毒素粗提液处理后,浸出液的相对电导率均有所增加,但各浓度的增加幅度有差异。随着毒素粗提液作用时间的延长,不同时间处理下的丙二醛(MDA)含量及变化幅度存在差异。处理组丙二醛(MDA)含量呈先下降后上升,对照组变化幅度较小,不同浓度的毒素粗提液处理饲用玉米种子2d后,胚根丙二醛(MDA)含量均明显提高;随毒素粗提液浓度的降低,胚根丙二醛(MDA)含量降低,含量提高率下降,处理间差异显著。饲用玉米叶片中叶绿素a、b的浓度及总叶绿素含量都明显下降,处理组与对照组之间各指标值差异显著,总叶绿素含量降低率分别为23.70%和49.78%,其中大斑病粗毒素处理后下降幅度最大的为叶绿素a,降低率为25.40%;褐斑病粗毒素处理后下降幅度最大的为叶绿素b,降低率为64.89%。由此可见,大斑病和褐斑病病原菌毒素粗提液侵染降低了植物叶片对光能的吸收。(3)饲用玉米胚根内防御酶活性的测定表明,相同浓度25%的饲用玉米两种病菌毒素粗提液处理1.5d、2d、3d、4d、5d后,随着两种毒素粗提液作用时间的延长,其胚根内过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和过氧化氢酶(CAT)均有不同程度下降。前四种防御酶活性经毒素粗提液处理后活性均呈先升高后降低的趋势,过氧化氢酶(CAT)活性呈现先下降后上升的趋势;用50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%五个不同浓度的两种病菌毒素粗提液处理2d后,其胚根内过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和过氧化氢酶(CAT)活性均有不同程度下降,随着毒素粗提液浓度的降低,酶活性主要呈现上升趋势,不同浓度处理结果间存在不同的显著关系。
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