基于MARK途径的RON介导的MDCK细胞上皮-间质转化的机制研究

• 作 者: 徐向明
• 机 构: 浙江大学
• 出 处: 浙江大学
• 发表日期: 2011年期
• 关键词: RON蛋白 上皮-间质转化 MAPK途径 三级激酶级联反应 MDCK细胞 肿瘤侵袭

目的：　　
EMT是许多肿瘤侵袭和转移早期的一个重要过程，RON蛋白也可能同时参与其中。在本研究中，我们通过Western blotting和细胞划痕迁移试验分析了RON在MDCK细胞EMT过程中的作用和机制。　　
方法：　　
2nMMSP刺激72h后，比较经RON-cDNA转染的MDCK细胞和正常MDCK细胞形态学改变，采用划痕试验分析经MSP刺激的细胞迁移能力改变，Western Blotting分析经RON-cDNA转染后细胞的E-cadherin、Vimentin、Snail、Twist等表型相关蛋白改变及Erk1/2、GSK-3β等相关信号分子改变。并分析上述改变能否被信号通路相关抑制剂逆转。　　
结果：　　
1.巨噬细胞刺激蛋白(MSP)刺激后，经MDCK细胞转染RON-cDNA而得的RE7细胞逐个分散。　　
2.由MDCK细胞转染wt-RON来源的RE7细胞与MDCK细胞相比，不表达E-cadherin而表达vimentin及Snail表达增加。　　
3.RE7细胞经MSP刺激后为细胞迁移能力增加(69％的划痕区域被覆盖)及Erk1/2活性增加和GSK-3β活性下降。　　
4.上述现象可以被MAPK/ERK激酶特异的化学抑制剂PD98059(50μM)抑制。　　
结论：　　
RON可以通过Erk1/2途径介导MDCK细胞的EMT过程。同时，GSK-3β能通过这条通路调节Snail从而调控EMT的过程。