论文部分内容阅读
背景和目的在所有恶性肿瘤中,结直肠癌(colorectal cancer,CRC)在全球男性和女性中的发病率均位列第三,是影响公共卫生健康的重大疾病。结直肠癌在基因和分子水平上具有高度的异质性,是一种复杂且进程缓慢的多步骤生物学过程。微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)是结直肠癌的第二大发病途径,约15%结直肠癌经此途径发生。MSI主要由错配修复基因发生结构性突变、甲基化或缺失,继而引起的错配修复(mismatch repair,MMR)功能缺陷所致。MMR系统是体内一个重要的安全保障系统,主要功能是识别和修复DNA复制期间可能出现的单碱基核苷酸的错配、插入或缺失。该系统的缺失使得DNA修复机制减弱,潜在突变加速积累,复制过程中的错误率可增加到100～1000倍。MMR系统缺陷与某些类型癌症的易感性增加有关,特别是结直肠癌。高度微卫星不稳定(microsatellite instability-high,MSI-H)型结直肠癌具有区别于微卫星稳定(microsatellite stability,MSS)/低度微卫星不稳定(microsatellite instability-low,MSI-L)型结直肠癌的临床表现和病理特征,在诊疗选择及预后判断等方面均有差异。尽管近年来结直肠癌的总体存活率有所改善,但对经一线、二线治疗后病情再进展人群的治疗面临着诸多挑战。近年来,免疫治疗领域取得了快速发展,为转移性结直肠癌的治疗提出了新的思路。然而,并不是所有结直肠癌都会产生高度的炎症反应,免疫检查点抑制剂已被证明对错配修复功能缺失(deficient mismatch repair,dMMR)型或MSI-H型转移性结直肠癌患者有利,而对错配修复完整(proficient mismatch repair,pMMR)型结直肠癌并无疗效。因此,对结直肠癌患者进行准确的分子表型分类对结直肠癌的个体化预后和治疗有重要价值。目前,免疫组化法MMR检测已成为结直肠癌微卫星状态的一线筛查手段,本研究运用免疫组化法分析MMR蛋白表达状况与结直肠癌患者临床病理特征的相关性,探讨了 MMR检测对治疗及预后的指导意义,为结直肠癌临床诊疗提供依据。方法1、选取并收集2019年6月至2020年3月在苏北人民医院接受结直肠癌手术治疗的162例患者的临床及病理资料。患者的纳入标准为:(1)经组织学病理证实为结直肠癌;(2)未行术前抗肿瘤治疗,包括放化疗、免疫治疗等;(3)接受了根治性切除或姑息性手术;(4)有可供分析的临床和病理资料。排除标准为:(1)阑尾和肛管肿瘤;(2)结直肠转移瘤;(3)鳞状细胞癌、黑色素瘤和胃肠道间质瘤;(4)原位癌(高级别上皮内瘤变);(5)诊断或者结合病史考虑为遗传性腺瘤性息肉病及HNPCC患者。2、采用免疫组织化学法检测162例结直肠癌患者中MLH1、MSH2、MSH6及PMS2蛋白的表达情况。当四种MMR蛋白均表达时,判定为pMMR;若四种蛋白中出现一种或多种不表达,则判定为dMMR。本研究对结直肠癌相关临床病理特征与dMMR表达之间的关联进行回顾性分析。3、运用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。单因素分析使用卡方检验,多因素分析使用二元Logistic回归分析,相关性分析使用Spearman秩分析。结果1、MMR蛋白在结直肠癌中的表达情况:162例结直肠癌病例中,有62例为dMMR,缺失率为 38.3%。MLH1、MSH2、MSH6 及 PMS2 缺失率分别为 16.7%、2.5%、1.9%、34.6%。MLH1-PMS2联合缺失率为14.8%,MSH2-MSH6联合缺失率1.2%,MLH1-MSH2联合缺失率1.2%,MSH2-PMS2蛋白联合缺失率1.2%。Spearman秩分析结果示:MLH1与PMS2表达有显著相关性(rs=0.51 1,P=0.000),MSH2与MSH6表达有显著相关性(rs=0.568,P=0.000)。MMR蛋白经常联合表达缺失,并以MLH1-PMS2联合表达缺失最为多见。2、与dMMR型结直肠癌相关的临床病理特征分析:dMMR型结直肠癌相比pMMR型结直肠癌,在性别、发病年龄、浸润程度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期中,dMMR与pMMR病例无统计学意义(均P>0.05);而在肿瘤部位、肿瘤直径及肿瘤细胞分化程度中dMMR与pMMR病例差异有统计学意义(P<0.05);亚组分析显示MLH1蛋白表达情况与肿瘤直径相关(P<0.05),PMS2蛋白表达情况与肿瘤部位、肿瘤直径及细胞分化程度都有关(P<0.05)。多因素分析结果显示dMMR与肿瘤部位、肿瘤直径及细胞分化程度有密切关联(P<0.05)。结论1、dMMR型结直肠癌相比pMMR型在结直肠癌中的总体占比较低;四种MMR蛋白中以MLH1、PMS2缺失多见;MMR蛋白常联合表达缺失,以MLH1-PMS2联合表达缺失最为常见。2、dMMR型结直肠癌具有区别于pMMR结直肠癌的临床病理学特征。dMMR型结直肠癌好发于肿瘤位于右半结肠、直径较大、肿瘤细胞分化程度较低的患者。MLH1缺失好发于肿瘤直径较大者;PMS2缺失好发于肿瘤位于右半结肠、直径较大、肿瘤细胞分化程度较低的患者。