白腐菌漆酶基因的克隆及其在酵母中的表达研究

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利用漆酶铜离子结合区氨基酸序列高度保守的特点设计简并引物,综合运用RT-PCR(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction简称RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,简称RACE)、基因组步行(Genome Walking)等分子生物学技术,分别从平菇、黑木耳、金针菇和灵芝4种白腐菌中克隆到5个漆酶基因的全长cDNA和两个全长的漆酶结构基因,经测序和BLAST比对分析表明在氨基酸水平上分别与来源于Pleurotus ostreatus、Pleurotus ostreatus、Emericellanidulans、Polyporus ciliatus和Trametes pubescens的漆酶同源性最高,为97﹪、100﹪、29﹪、70﹪和68﹪.将这5个基因分别命名为lccPo1、lccPo2、lccAa、lccFv和lccGl并将其序列提交GenBank,登录号分别为AY450404、AY485827、AY450405、AY450406和AY485829;两个结构基因分别命名为glccFv和glccGl,其序列提交GenBank,登录号分别为AY485826和AY485825.
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