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目的:烫伤后胃肠动力障碍可导致细菌/内毒素移位,目前被认为是多器官功能障碍综合征(MODS)的始动机制之一。本实验旨在通过研究豚鼠烫伤及内毒素(LPS)腹腔注射后肠道碳素墨水推进距离的变化及采用竞争性固相酶联免疫法检测豚鼠肠道内降钙素基因相关肽(CGRP)的含量以及运用考马斯亮兰蛋白质测定法(G-250)检测烫伤及内毒素腹腔注射后肠道内Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、及Ca2+- Mg2+-ATP酶的含量的变化,研究严重烫伤后豚鼠胃肠动力障碍与肠道组织内降钙素基因相关肽、Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、及Ca2+- Mg2+-ATP酶含量的相互关系,初步探讨烫伤后胃肠动力障碍的发生机制。
方法:取健康豚鼠30只,分为烫伤组、内毒素组及对照组,每组各10只,所有动物实验前禁食一天,自由饮水,造好模型后半小时用大号灌胃针予碳素墨水灌胃(5ml/只),于烫伤及内毒素腹腔注射后一小时头部钝击处死动物,剪开腹腔,分离肠管,分别测量碳素墨水在豚鼠肠道中的推进距离(以豚鼠幽门为基点),然后在距盲肠20cm处取肠道组织,长约10cm,剖开肠管,以无钙生理盐溶液反复清洗肠道组织,吸干、称重、制成10%肠道组织匀浆,用竞争性固相酶联免疫法测定肠道组织中降钙素基因相关肽的含量及用考马斯亮兰蛋白质测定法检测豚鼠肠道组织内Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、及Ca2+- Mg2+-ATP酶的含量的变化,检测结果采用统计分析软件SPSS11.0进行采样和分析。
结果:1. 豚鼠烫伤及内毒素腹腔注射一小时后,烫伤组、内毒素组、对照组豚鼠肠道碳素墨水推进距离分别为53.00±8.88cm、91.00±10.22cm、142.00±11.11cm,烫伤组及内毒素组豚鼠肠道碳素墨水推进距离明显缩短,和对照组比较有统计学上意义(P<0.001),烫伤组和内毒素组比较,烫伤组豚鼠肠道推进距离更短,两组相比有统计学上的意义(P<0.001)。2. 豚鼠烫伤及内毒素腹腔注射一小时后,烫伤组、内毒素组、对照组豚鼠肠道降钙素基因相关肽的含量分别为52.38±39.23 ng/ml、20.48±23.11 ng/ml、0.75±1.96 ng/ml ,烫伤及内毒素腹腔注射后,豚鼠肠道组织中降钙素基因相关肽的含量均不同程度地增高,和对照组比较有明显的统计学上差异(P<0.05),烫伤组及内毒素组相比较,降钙素基因相关肽增高幅度亦有明显差别,烫伤组增高幅度较内毒素组大,两者比较有统计学上差异(P<0.05)。3. 豚鼠烫伤及内毒素腹腔注射一小时后,烫伤组、内毒素组、对照组豚鼠肠道组织内Na+-K+-ATP酶分别为1.23±0.40、0.90±0.35、1.62±0.46μmol /mg-1/ h-1,Mg2+-ATP酶分别为1.05±0.32、0.85±0.46、1.42±0.54μmol /mg-1/ h-1,Ca2+-ATP酶分别为0.95±0.21、0.88±0.38、1.37±0.42μmol /mg-1/ h-1,Ca2+- Mg2+-ATP酶分别为0.90±0.30、0.90±0.34、1.42±0.41μmol /mg-1/ h-1,烫伤及内毒素腹腔注射后Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、及Ca2+- Mg2+-ATP酶和对照组比较呈不同程度降低,有统计学上意义(P<0.05),烫伤组和内毒素组相比较,各ATP酶降低程度无明显差别,无统计学意义。
结论:1)烫伤及内毒素腹腔注射后豚鼠的肠道推进功能较对照组明显受到抑制,烫伤组和内毒素组比较,烫伤组豚鼠肠道推进功能抑制较内毒素组更为明显。2)烫伤及内毒素腹腔注射后豚鼠肠道组织中的降钙素基因相关肽的含量较对照组明显增多,烫伤组及内毒素组相比较,烫伤组降钙素基因相关肽增高幅度较内毒素组更加明显。3)烫伤及内毒素腹腔注射后豚鼠肠道组织中Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、及Ca2+- Mg2+-ATP酶的含量较对照组明显减少,烫伤组及内毒素组相比较,两组各ATP酶减少程度无明显差异。