慢性肝炎患者血清中sICOS和sPD-1的表达及意义

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目的:检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)和慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C,CHC)患者血清中可溶性可诱导共刺激分子(soluble inducible co-stimulator,s ICOS)和可溶性程序性死亡蛋白1(soluble programmed death protein 1,s PD-1)的蛋白水平,并初步探讨其意义。方法:1.本实验包含80例CHB、63例CHC患者和30例健康体检者。收集所有研究对象的外周血上清并分离出CHB患者外周血单个核细胞(PBMCs)。根据HBs Ag和HBe Ag测定值,将CHB患者分为HBe Ag(-)和HBe Ag(+)两组;并将HBe Ag(+)组分为免疫耐受期和免疫清除期。2.ELISA法检测以上研究对象外周血上清中s ICOS和s PD-1蛋白浓度。3.用植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)活化CHB患者的PBMCs,实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测活化前后CHB患者PBMCs中ICOS m RNA、PD-1 m RNA和PD-1Δex3 m RNA的表达水平。结果:1.与健康对照相比,s ICOS在CHB患者中均增高(p<0.05);而s PD-1仅在HBe Ag(+)组显著增高(p<0.01),其中免疫清除期比免疫耐受期患者增高更明显(p<0.05)。2.CHB患者的s PD-1与AST呈正相关(r>0.5,p<0.01);且HBe Ag(+)组的s PD-1与ALT呈正相关(r>0.5,p<0.01);而两组CHB患者的s ICOS与ALT、AST均没有相关性(p>0.05)。3.CHB患者的s ICOS与HBV-DNA呈弱的负相关性(r<-0.4,p<0.05),但与HBe Ag血清水平不相关。4.与健康对照相比,活化前,两组CHB患者的ICOS m RNA表达水平均降低(p<0.05);而PD-1 m RNA和PD-1Δex3 m RNA在活化前后,均无明显差异。5.与健康对照组相比,CHC患者外周血中s ICOS和s PD-1蛋白均异常增高(p<0.01),且s PD-1与ALT、AST水平成正相关(r>0.25,p<0.05)。6.s ICOS和s PD-1与抗HCV抗体均成正相关(r>0.3,p<0.01),而与HCV-RNA没有相关性。结论:s ICOS和s PD-1在CHB及CHC患者的血清中均异常增高,且与ALT、AST等肝损伤指标以及病毒复制指标存在一定的相关性,提示s ICOS和s PD-1可能参与了CHB、CHC的发生发展,但它们的具体生物学意义还有待进一步研究。
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