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以运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)CICCl0232菌株为材料,通过高温和酸性培养基驯化培养,并辅以紫外诱变,选育出一株能在pH4.0,温度为39℃的条件下生长并产酒精的突变株。
高温驯化采用从3O℃的正常生长温度逐步升温培养的方法,经过32℃、35℃、37℃、38℃、39℃和40℃六个温度梯度的驯化培养,获得了能在38℃下生长的菌株,经测定菌株在38℃培养的细胞生长量和酒精产量表明比生长速率达到0.O36/h,酒精产量达到2.56%(g/g,对发酵液,以下同),产率为O.71g/kg.h(对发酵液,以下同)。
从耐高温驯化选得的菌株出发进一步进行耐酸驯化,将菌种分别用pH6.5、6.O、5.5、5.O、4.5的培养基逐步进行耐酸性驯化培养,获得了能在pH值4.5和37℃生长的菌株,经测定菌株在pH4.5的液体培养基中细胞生长量和酒精产量表明所选菌株比生长速率达到0.042/h,酒精产量达到3.20%,产率为0.89g/kg.h。
对筛选得到的耐高温、耐酸的运动发酵单胞菌菌株,进一步进行紫外诱变,然后用酸性培养基在高温下筛选,获得了能在39℃,pH4.0条件下生长的菌株,经测定菌株在该条件下比生长速率达到0.030/h,酒精产量达到1.48%,产率为O.4lg/kg.h。在降低培养温度到37℃条件下,保持酸度为pH4.0发酵,菌株比生长速率达到0.042/h,酒精产量可以达到3.60%,产率为1.0g/kg.h。