组织弥散弹性成像定量评价大鼠肝纤维化的初步研究

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目的:探讨利用实时超声弹性成像组织弥散定量分析技术评价大鼠肝纤维化程度的可行性,为临床早期发现肝纤维化提供基础资料和可靠依据。  材料与方法:  一.模型制作:  Wistar大鼠80只,雄性,清洁级,体重280~350g,平均301.31±14.92g,中国医学科学院药物研究所饲养,饲喂标准丸状饲料,外部环境通风好,噪音小,温度20-29℃,空气湿度50-70%。将其随机分为A、B两组,A组(正常对照组)8只,B组(肝纤维化模型组)72只。于B组大鼠饮用水中加入苯巴比妥片35mg/dL,给大鼠饮用一周后,改为饮用纯净水,然后腹腔注射40%CCL4橄榄油溶液2ml/kg,每周注射2次,A组一直饮用纯净水,腹腔注射生理盐水,8周后完成造模。  二.检查方法:  于造模第3-8周每周末随机选取6-8只大鼠进行肝脏超声弹性成像检查。仪器为日立公司的HIVisionPreirus彩色多普勒超声诊断仪,EUP—L74M线阵探头,频率5~13MHz,使用组织弥散定量分析软件。  造模后的大鼠用10%的水合氯醛0.3ml/100g麻醉后固定,仰卧位、备皮,选取肝右叶进行检查,尽量避开肝内较粗的管道结构,启动弹性成像功能,将感兴趣区置于肝包膜下1mm处,设置感兴趣区的大小为15mm×10mm,利用大鼠心脏搏动作为外力,出现随心跳波动的稳定波形后冻结图像,选取波谷截点图像进行分析,稳定的弹性图表现为蓝红绿三色相间,启动组织弥散定量分析软件,分析区域面积为100~150mm2,分析后将得到应变均值(MEAN)、标准差(SD)、蓝色区域面积(AREA%)、复杂度(COMP)、峰度(KURT)、偏度(SKEW)、对比度(CONT)、均等性(ENT)、杂乱度(IDM)、一致性(ASM)和相关性(CORR)11个弹性图像的量化数据,重复操作5次,取5次结果的平均值。  三.统计学方法  采用SPSS17.0统计分析软件。各纤维化分期之间11个弹性特征量比较行单因素方差分析(One-wayANOVA)。11个弹性特征量与肝纤维化程度的相关性采用Spearman等级相关进行分析,并应用逐步多元回归筛选出最有意义的参数构建ROC曲线,计算曲线下面积,以P<0.05为差异有统计学意义。  结果:  一、造模结果  造模成功的大鼠56只,其中F0期8只,F1期12只,F2期9只,F3期15只,F4期12只,其中有腹水形成的大鼠3只。  二、统计结果  11个弹性特征量除了COMP、ASM多组间比较无统计学意义,其他参数多组间比较均有统计学差异(p<0.05);相关分析显示除了COMP、ASM之外,其他参数均与病理分期相关(p<0.05),其中AREA%的相关性最好(r=0.770)。以AREA%判断肝纤维化分期绘制ROC曲线,曲线下面积分别为0.875(F≥F1)、0.931(F≥F2)、0.903(F≥F3)、0.939(F=F4)。诊断F≥F1期的敏感性为83.3%、特异性为75%、准确性为82.1%;诊断F≥F2期的敏感性为86.1%、特异性为85%、准确性为85.2%;诊断F≥F3期的敏感性为85.2%、特异性为82.8%、准确性为83.9%;诊断F4期的敏感性为91.7%、特异性为86.4%、准确性为87.5%。  结论:基于实时超声弹性成像技术的组织弥散定量分析软件可以对大鼠肝纤维化分期进行评估,是对传统超声的一种有价值的补充。
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