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目的: 温和灸缓解内脏痛的穴区启动研究主要围绕TRPV1展开，认为激活TRPV1促进其活化是主要机理。结合体表TRPV1的特点，主要区分为神经性TRPV1和非神经性TRPV1。本项研究从穴区体表nTRPV1的角度，阐释温和灸干预内脏痛模型的靶器官效应和穴区皮肤启动机制。 方法: 第一部分 不同温度对照研究:36只雄性野生型C57BL/6清洁级小鼠随机分成4组:正常组(Control，Con)、模型组(Model，Mod)、温和灸对照组(Mineral Moxibustion，MMox)、温和灸组(Moxibustion，Mox)，每组9只。8周龄时，采用TNBS灌肠制备IBS慢性内脏痛小鼠模型。于造模28天后，对温和灸组和温和灸对照组小鼠进行温和灸干预，每天1次，每次10min，连续7天，用红外热像仪监测小鼠双侧足三里穴区皮肤艾灸温度。温和灸对照组:足三里穴区温度控制在（37±1）℃，温和灸组:足三里穴区温度控制在（45±1）℃。观察干预前后AWR评分，Western Blotting定量检测DRG、脊髓TRPV1表达，免疫组化定性、半定量分析结肠组织5-HTR3和5-HTR4，ELISA定量检测结肠组织5-HT。同时应用Western Blotting检测分析穴区TRPV1总蛋白和膜蛋白的表达，免疫荧光检测穴区nTRPV1的表达。 第二部分 1.穴区皮肤TRPV1阻断研究:56只雄性野生型C57BL/6清洁级小鼠随机分成7组:正常组(Con)、模型组(Mod)、温和灸组(Mox)、低剂量辣椒平(LCPZ)组、低剂量辣椒平+温和灸组(LCPZ+Mox)、高剂量辣椒平组(HCPZ)、高剂量辣椒平+温和灸组(HCPZ+Mox)，每组8只。Mox:穴区温度控制在（45±1）℃的温和灸。造模方法、干预方法和周期同第一部分。其中，注射CPZ的小鼠每次干预前30min，足三里穴区皮下注射CPZ。通过对穴区皮肤TRPV1的阻断，观察干预前后AWR评分，Western Blotting检测DRG、脊髓中TRPV1的表达，采用Western Blotting检测穴区皮肤TRPV1总蛋白和膜蛋白的变化、免疫荧光检测穴区nTRPV1的表达。 2.穴区皮肤神经源性TRPV1(nTRPV1)阻断研究:56只雄性野生型C57BL/6清洁级小鼠随机分成7组:正常组(Con)、模型组(Mod)、温和灸组(Mox)、坐骨神经结扎组(SNL)、坐骨神经结扎+温和灸组(SNL+Mox)、树脂毒素组(RTX)、树脂毒素+温和灸组(RTX+Mox)，每组8只。造模方法、干预方法和周期同第一部分。于治疗前2周，施行SNL手术或皮下注射RTX，以抑制nTRPV1的表达。通过对穴区皮肤nTRPV1的特异性阻断，观察干预前后AWR评分，Western Blotting检测DRG、脊髓中TRPV1的表达，采用Western Blotting检测穴区皮肤TRPV1总蛋白和膜蛋白的变化、免疫荧光检测穴区nTRPV1的表达。 结果: 第一部分 经TNBS造模后，造模各组AWR评分，与正常组比较明显升高(P＜0.05)。温和灸干预7天后，与模型组比较，温和灸组在30mmHg和45mmHg压力下的AWR评分显著降低(P＜0.05)。而温和灸对照组的AWR评分，与模型组相比，无明显降低（P＞0.05）。模型组和温和灸对照组DRG、脊髓TRPV1蛋白表达均高于正常组(P＜0.001)。与模型组比较，温和灸组穴区皮肤TRPV1总蛋白和膜蛋白的表达明显增加(P＜0.001);温和灸组穴区nTRPV1蛋白的表达上调(P＜0.01)。结肠5-HT含量四组之间比较均无显著性差异（P＞0.05）。与正常组比较，模型组结肠5-HTR3的表达增加，5-HTR4的表达降低（均P＜0.001）。与模型组比较，温和灸对照组结肠5-HTR3、5-HTR4均无显著性差异（P＞0.05），温和灸组结肠5-HTR4显著升高(P＜0.001)，5-HTR3无显著性差异(P＞0.05)。 第二部分 1.温和灸干预7天后，与模型组比较，温和灸能显著降低AWR评分、DRG和脊髓中TRPV1蛋白表达(P＜0.05)，穴区皮肤总蛋白、膜蛋白和nTRPV1的表达增加(P＜0.05)。穴区皮下注射CPZ低剂量或高剂量阻断后，再行温和灸干预，AWR评分、DRG和脊髓中TRPV1蛋白表达均不降低，穴区皮肤TRPV1总、膜蛋白表达和nTRPV1的蛋白表达均不增加。 2.温和灸干预7天后，与模型组比较，温和灸能显著降低AWR评分、DRG和脊髓中TRPV1蛋白表达(P＜0.05)，穴区皮肤总蛋白、膜蛋白和nTRPV1的表达均增加(P＜0.05)。使用SNL和RTX阻断穴区皮肤nTRPV1后，穴区皮肤TRPV1总蛋白、膜蛋白表达均下降(P＜0.05)，nTRPV1蛋白表达减少（P＜0.05），与模型组比较，温和灸后AWR、DRG和脊髓中TRPV1蛋白表达无变化(P＞0.05)。温和灸介入后，SNL+Mox和RTX+Mox均未能降低AWR评分、DRG和脊髓中TRPV1表达（P＞0.05），穴区皮肤TRPV1膜蛋白表达和nTRPV1蛋白表达均未上调(P＞0.05)。 结论: 1.IBS慢性内脏痛小鼠模型疼痛的产生与DRG、脊髓TRPV1蛋白激活密切相关。 2.温和灸（45±1）℃足三里穴能有效缓解慢性内脏痛，其机制与其调节足三里穴区皮肤TRPV1的敏化，调节DRG、脊髓中TRPV1的表达有关。 3.温和灸（45±1）℃足三里穴能激活穴区局部神经性TRPV1的活性，可能是温和灸缓解IBS小鼠慢性内脏痛的穴区启动机制之一。