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研究目的:疟疾尤其是恶性疟目前仍然是世界上严重危害人类健康的主要传染病之一,研制有效的抗疟疫苗具有重要的理论意义和实际应用价值.由于疟原虫复杂的生活史、繁多的抗原成分及强大的免疫逃避能力,迄今在研究有效应用的疟疾疫苗方面还没有取得令人满意的成果.DNA疫苗技术的出现为疫苗的研制开辟了新的途径.与传统的蛋白多肽类疫苗相比,DNA疫苗具有诸多优点:它可在体内持续表达与天然抗原构象相似的抗原蛋白;不但可诱导机体的体液免疫,产生抗原特异性抗体,也可诱导机体的细胞免疫,产生细胞毒T细胞,而细胞免疫对于抵御像疟原虫这样的胞内寄生虫感染十分重要.结论:用亚克隆方法构建一个含多个T细胞B细胞表位的恶性疟原虫保护性抗原复合基因HGFSP的重组真核表达质粒pc-HGFSP;经脂质体介导转染肝癌细胞HepG2株,建立了体外稳定表达HGFSP抗原的pc-HGFSP/HepG2细胞系;IFA、SDS-PAGE、Western-blot证实其表达产物具抗原性.用此DNA疫苗肌注免疫小鼠,观察到pc-HGFSP可诱导小鼠细胞免疫及体液免疫应答,表现为淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性及CTL活性的增高及血清出现抗HGFSP特异性抗抗,同时血清NO含量有所增高;CD8<+>T细胞也有增加趋势.pc-HGFSP的细胞免疫诱导活性可能与HGFSP结构中不但同时含有多个T细胞B细胞表位,还有IL-1及TT和T细胞表位,加强了对细胞免疫的刺激作用有关.高浓度免疫血清对体外培养的恶性疟原虫生长有抑制作用,提示其可能与疟原虫虫体的某些抗原成分发生免疫反应而抑虫生长.该文通过对pc-HGFSP DNA疫苗免疫学特性的研究,为结合应用含HGFSP基因的DNA疫苗、重组蛋白疫苗和重组痘苗病毒疫苗进行抗攻击试验奠定基础.