CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg,Th1和Th17细胞在脑动脉支架植入术后的炎症相关性研究

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血管内支架植入术已成为我国治疗脑血管狭窄的主要选择之一。支架的植入可以有效的扩大管腔直径,增加血管供血,但术后再狭窄(in-stent restenosis,ISR)的发生严重影响患者的远期疗效。影响支架植入远期疗效的原因有很多,但已发现炎症反应是影响术后血管内膜增生和远期预后的重要环节。动脉粥样硬化斑块的形成是导致血管管腔狭窄的主要原因,而斑块的形成是多种细胞参与的一个慢性炎症反应过程。目前已发现具有适应性免疫应答的CD4~+T细胞在动脉粥样硬化性疾病(atherosclerosis,AS)的发生发展中具有重要作用。CD4~+T细胞根据分泌的细胞因子的差异,大致可分为Th1、Th2、Th17和Treg细胞亚群。各细胞亚群在免疫系统中具有不同的作用,但彼此在成熟分化和功能发挥方面相互联系,形成网络以维持免疫应答的动态平衡。我们前期研究发现在颅内动脉粥样硬化(Intracranial atherosclerosis,ICAS)中存在CD4~+T细胞亚群促炎和抗炎因子的失衡。既往研究已经发现在冠状动脉血管和脑血管支架植入术后存在机体的炎症反应,但脑血管支架植入术后的炎症反应中是否也有CD4~+T细胞的参与,是否也存在抗炎和促炎细胞的失衡?目前关于CD4~+T细胞在脑血管支架植入后的研究还鲜有报道。因此,系统观察脑血管支架植入术后与CD4~+T细胞相关的指标,可能有助于为预防支架术后再狭窄和再发卒中提供新的思路和方法。目的:以脑血管支架植入患者为研究对象,通过流式细胞仪、定量PCR和ELISA实验方法探讨CD4~+CD25~+FOXP3+Treg、Th17和Th1细胞在脑血管支架植入术后的表达,进一步了解Treg细胞、Th17和Th1细胞在支架植入术后的炎症免疫反应过程。方法:根据北美症状性颈动脉内膜切除术试验(North American SymptomaticCarotid Endarterectomy Trial,NASCET)的入选标准,筛选50例给予脑血管支架植入的患者,同时以30例年龄匹配,有脑血管狭窄的危险因素但没有出现血管狭窄的志愿者做为对照组。签定知情同意书后,分别在患者术前、术后7天和术后3月,用流式细胞仪检测Treg细胞、Th17和Th1细胞在外周血中的频率,定量PCR检测转录因子Foxp3、RORγt和T-bet的mRNA水平, ELISA检测其相关细胞因子TGF-β、IL-17A和IFN-γ的表达,同时检测各个随访时间点外周血中hsCRP的水平。结果:与对照组比较,脑血管支架植入患者外周血中CD4+CD25+FOXP3+Treg的细胞频率、转录调节因子及其分泌的细胞因子在术后7天降低,在术后3月的时候恢复至对照组水平;而hsCRP水平和Th17细胞的变化趋势与Treg细胞相反,在术后7天急性期升高,术后3月下降至对照组水平(P <0.05)。同时,我们没有发现Th1细胞的细胞频率、转录调节因子及其细胞分泌因子在支架植入前后具有显著性变化(P>0.05)。结论:在脑血管支架植入患者体内存在促炎和抗炎因子的失衡。Treg细胞可能参与了脑血管支架植入后引发的局部和系统的急性炎症反应,且后期增加的Treg细胞可能与抑制术后慢性炎症反应有关。
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