【摘 要】
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作为火麻籽榨取火麻油之后的副产物,火麻籽粕具有成本低廉、蛋白质含量高和氨基酸组成丰富的特点,有作为人类蛋白质营养补充剂和功能食品原料的潜在价值。本文研究了火麻籽粕蛋白的提取工艺、功能特性和消化特性,优化了酶法制备具备α-葡萄糖苷酶抑制活性酶解产物的工艺,并阐明了酶解产物的理化性质、抗氧化活性、抑制机理及加工和消化稳定性。对酶解产物中的活性肽进行分离纯化、鉴定、虚拟筛选和合成验证。考察了酶解产物对C
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作为火麻籽榨取火麻油之后的副产物,火麻籽粕具有成本低廉、蛋白质含量高和氨基酸组成丰富的特点,有作为人类蛋白质营养补充剂和功能食品原料的潜在价值。本文研究了火麻籽粕蛋白的提取工艺、功能特性和消化特性,优化了酶法制备具备α-葡萄糖苷酶抑制活性酶解产物的工艺,并阐明了酶解产物的理化性质、抗氧化活性、抑制机理及加工和消化稳定性。对酶解产物中的活性肽进行分离纯化、鉴定、虚拟筛选和合成验证。考察了酶解产物对Caco-2细胞中α-葡萄糖苷酶活性和葡萄糖转运的抑制效果,以期为火麻籽粕的深加工利用提供理论依据。主要研究内容及结论如下:（1）带壳火麻籽粕蛋白（NDHP）提取的最佳工艺为料液比1:10、温度50℃、时间3 h和初始p H 12.0,蛋白回收率为46.94%,蛋白含量为81.97%;脱壳火麻籽粕蛋白（DHP）提取的最佳工艺为料液比1:10,温度40℃,时间3 h,初始p H 12.0,蛋白回收率为89.41%,蛋白含量为88.56%。两种火麻蛋白在p H 5.0附近都有最低的溶解度。DHP的持水性与持油性优于NDHP。两种火麻蛋白起泡性和泡沫稳定性较低,乳化性相当,而DHP比NDHP有更高的乳化稳定性和体外模拟胃肠消化率。（2）综合考虑酶解效果和成本控制,料液比1:10（w/w）,温度55℃,时间6 h,碱性蛋白酶37071酶添加量1.00%（w/w）和p H 8.0为最佳工艺。酶解产物对α-葡萄糖苷酶的IC50值为2.83 mg/m L;酶解产物中分子量在500～1000 Da的多肽为主要部分,占53.95%;酶解产物对DPPH和ABTS的半数清除浓度分别为2.27 mg/m L和0.92mg/m L。酶解产物抑制α-葡萄糖苷酶活性属于可逆性混合型抑制。（3）酶解产物有较好的温度和酸碱稳定性,对低浓度金属离子也有较好的稳定性,模拟消化有助于抑制活性增加。乙醇分级所得上清组分是进一步研究的最佳组分,利用高分辨率液质联用可从中鉴定出345个多肽,相对峰面积大于0.5%多肽有49个,利用虚拟筛选进一步从中筛选出6个潜在α-葡萄糖苷酶抑制肽,通过合成多肽发现TGLGR、SPVI、FY和FR具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性。（4）酶解产物对Caco-2细胞中的蔗糖酶和麦芽糖酶都有一定的抑制效果;一定浓度火麻籽粕酶解产物对不同浓度葡萄糖的转运均有一定抑制效果,且在低葡萄糖浓度下的抑制效果相对更好。
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