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随着生物技术的发展,无血清培养基的应用越来越广泛,对其添加的蛋白在质和量的方面也越来越高.该文中作者首先讨论了无血清培养基添加蛋白-牛血清白蛋白和转铁蛋白的纯化制备方法.在盐析分级沉淀中,(NH<,4>)<,2>SO<,4>分级浓度为25%、65%和85%,通过离子交换层析进一步纯化了转铁蛋白;通过乙醇沉淀和分子筛层析纯化了白蛋白.除去白蛋白和转铁蛋白中内毒素和脂类物质所用的活性炭深度为1%,操作条件分别为:转铁蛋白37℃,4hr,白蛋白56℃,30min,同时得到了符合无血清培养基添加蛋白的要求,纯度为电泳一条带,内毒素含量分别为:转铁蛋白0.17EU/mg,白蛋白0.34EU/mg,低于国外同类产品的标准(0.7EU/mg);白蛋白脂含量为0.0040%,亦低于国外同类产品的标准(<0.005%).回收率分别为白蛋白82%,转铁蛋白为75%,高于文献报道.用此方法制备的牛血清白蛋白和转铁蛋白用于支持CHO和SP2/0细胞培养实验,经过一个多月的验证,可以很好的维持细胞的正常生长、分化和繁殖.另外作者还研究了从牛全脑中纯化制备成纤维细胞生长因子的方法.在提取纯化过程中,使用0.1%的EDTA来抑制组织中多种水解酶对成纤维细胞生长因子的生物降解作用.用<3>H-TdR掺入实验检测到两种成纤维细胞生长因子的ED<,50>分别为酸性成纤维细胞生长因子:14.7ng/ml,碱性成纤维细胞生长因子:0.40ng/ml.活性回收为酸性成纤维细胞生长因子:5.6%,碱性成纤维细胞生长因子:11.1%,高于文献报道,两种成纤维细胞生长因子用于支持CHO细胞培养实验,ED<,50>分别为酸性成纤维细胞生长因子:21.6ng/ml,碱性成纤维细胞生长因子:1.02ng/ml,提示不同的靶细胞,成纤维细胞生长因子作用的灵敏度不一样.同时亦发现了酸性成纤维细胞生长因子生物可降解性大于碱性成纤维细胞生长因子.