【摘 要】
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钩端螺旋体病是一种在世界范围流行的自然疫源性疾病.其菌群、菌型十分复杂.目前仅致病性钩体就有23个血清群、255个血清型.而我国又是世界上菌群、菌型最为复杂的国家,迄今
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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钩端螺旋体病是一种在世界范围流行的自然疫源性疾病.其菌群、菌型十分复杂.目前仅致病性钩体就有23个血清群、255个血清型.而我国又是世界上菌群、菌型最为复杂的国家,迄今已达19个血清群74血清型,其中2个血清群,36血清型为我国发现的新的血清群、型对钩体进行血清群、型的鉴定具有一定的临床和流行病学意义,而传统的交叉显微凝集试验又具有一定的限制性:不仅需要保存一套标准菌株以及相应的免疫兔血清,而且费时费力,存在交叉反应,结果有时难以判定.因此建立一套既科学合理又具有一定实用价值的分型系统有着十分重要的意义.在用限制性内切酶EcoR I对56株国内外钩体参考株和28株野生株进行rRNA基因RFLP分析时发现:84个菌株中共有66个不同的核糖核酸型(RT),除Ballum和Guangdong型相同;赛尔东尼群的hainan和whitcombi型相同;赛罗群的wolffi和saxkoebing型相同、爪哇群中的mengrun和mengma型相同外,其它的血清型都有相互不同的RT,通过RT可区分不同的血清型.在进行rRNA基因MRSP分析时发现在49个血清型的参考菌株和10个野生株中,存在20种不同的图谱,16srRNA基因在HinF I、Dde I的酶切位点上呈多型性.用RFLP和MRSP就可以构建出钩体rRNA基因的指纹图谱.该指纹图谱和DNA同源性研究十分吻合,同一个基因型往往拥有共同的核心片断或相同的酶切位点,据此作者不仅能区分不同基因型的钩体菌株,还可以区分同一个基因型内不同的亚型(血清型).在所检测的实验菌株中致病性钩体有5个基因型,腐生菌一个基因型,细丝体一个基因型.在研究中还发现在我国新的血清型菌株以及野生株的rRNA基因中存在新的指纹图谱,这说明在我国的菌株中可能存在新的基因型,尤其在流感伤寒、黄疸出血、爪哇以及七日热等血清群中可能性更大.用来诊断致病性钩体的引物(G1、G2),在低严紧的条件下可以产生具有型特异性的PCR指纹图谱,该方法快速、直接、灵敏.一方面可以对钩体进行大体上的分类,另一方面可和上述方法相结合,作为一种筛选试验,排除非钩体感染的标本,以提高该系统的特异性和分型速度,减少盲目性.用上述三种方法作者初步构建出钩体rRNA基因分型系统:以LS-PCR作为筛选试验,排除非钩体感染的标本,同时可进行大体上分类;用rRNA基因MRSP区分不同的基因型,RFLP区分基因型内的不同亚型.该分型系统稳定、可靠、快速,同时和血清群、型联系密切,具有一定的实用价值.
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