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人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus，RSV)是全世界范围内引起婴幼儿，老年人、心肺病人及免疫缺陷病人下呼吸道疾病最重要的病原，是一种非分节段，负链RNA包膜病毒，属于副黏液病毒科。病毒基因组全长15.2kb，共有10个基因，可编码11种蛋白。其中，黏附蛋白(Glycoprotein，G)为RSV主要中和抗原，基质蛋白(Matrix protein，M)则在病毒的装配，出芽及病毒颗粒的形成中扮演着重要角色。因此，对RSVG蛋白、M蛋白的大量表达与纯化，是Rsv诊断试剂，亚单位疫苗及病毒样颗粒(VLPs)疫苗研制中需要首要解决的问题。 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统是制备RSV主要蛋白的常规方法，但存在纯化困难及操作繁琐等问题。而果蝇表达系统(Drosophila expression system)采用简单的载体及直接的转染方法，得到稳定表达的细胞系，可以较好地弥补杆状病毒系统的缺陷，同时也能够生产高表达水平的重组蛋白。 本论文采用果蝇表达载体系统，构建了可高效表达RSV G、RSV M的四种S2细胞株。将目的基因通过PCR扩增获得含信号肽的目的基因，与T载体连接后，转化大肠杆菌DH5α，并小提质粒，测序，酶切，回收目的基因，将其克隆进果蝇表达载体pMT/V5-His A中，获得带有目的基因的重组质粒，酶切后进行凝胶电泳鉴定；大提重组质粒后，将其与抗性筛选质粒pCoHygro共同进行磷酸钙转染S2细胞；转染完成后，采用300μg/ml的潮霉素B筛选，3-5天换一次培养液，持续培养四周后获得稳定表达的细胞系；采用终浓度为500μM的CuSO4诱导48 h后获得目的蛋白并用Western blot进行鉴定。本论文共构建了pMT-G-His，pMT-G，pMT-sM及pMT-sM-His四个质粒；稳定转染S2细胞后获得了表达G-His，G，sM，sM-His四种蛋白的细胞系，并对其进行了Western blot鉴定及初步纯化。